鈣池操縱性鈣內(nèi)流在人肺腺癌A549細(xì)胞中的研究.pdf

1、南方醫(yī)科大學(xué)2008級(jí)博士學(xué)位論文鈣池操縱性鈣內(nèi)流在人肺腺癌A549細(xì)胞中的研究TherolesofSCOEinhumanlungadenocarcinomaA549cell課題來(lái)源：鈣池操縱性鈣內(nèi)流在非小細(xì)胞肺癌中的功能研究國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(8107917)專業(yè)名稱學(xué)位申請(qǐng)人指導(dǎo)教師答辯委員會(huì)主席答辯委員會(huì)成員胸心外科楊海虹王武軍教授何建行教授戎鐵華教授劉啟才教授羅春生教授黃穗喬教授陳漢章教授曾慶思教授殷偉強(qiáng)教授論文評(píng)閱人楊運(yùn)

2、有教授蔡開燦教授張必良教授2012年5月21日廣州摘要上皮細(xì)胞，它們?cè)谀[瘤細(xì)胞中也陸續(xù)有相關(guān)的研究報(bào)道出現(xiàn)。NSCLC多來(lái)源于支氣管上皮細(xì)胞，因此我們選擇入肺腺癌細(xì)胞A549，研究SOCE在肺癌細(xì)胞中的表達(dá)情況；研究STIMI／ORAll介導(dǎo)的SOCE對(duì)肺癌細(xì)胞的生物學(xué)行為如增殖、遷移和侵襲功能的影響；研究NSCLC患者手術(shù)腫瘤組織中STIMl或ORAll表達(dá)和生存預(yù)后的關(guān)系。研究目的首先研究人NSCLC腫瘤組織中的SOCC通道STIM

3、l和ORAH的mRNA表達(dá)情況；其次在人肺腺癌細(xì)胞系A(chǔ)549中，研究SOCE與細(xì)胞增殖、遷移和侵襲的關(guān)系；然后研究STIMl和ORAll蛋白在A549細(xì)胞增殖、遷移和侵襲功能中的作用；最后研究NSCLC患者手術(shù)腫瘤組織中STIMl或ORAll蛋白表達(dá)和生存預(yù)后的關(guān)系。研究方法1、我們共收集20072009年NSCLC術(shù)后腫瘤組織和配對(duì)遠(yuǎn)癌正常肺組織(距腫瘤5cm)24例，標(biāo)本來(lái)自于廣州醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院呼吸疾病研究所胸心外科。所有患者術(shù)

4、前未行放化療和其他抗腫瘤治療。采用Trizol法提取組織總RNA，逆轉(zhuǎn)錄成cDNA，熒光定量PCR方法檢測(cè)組織STIMl和ORAHmRNA表達(dá)。2、人肺腺癌A549細(xì)胞，人支氣管上皮細(xì)胞16HBE購(gòu)自中國(guó)科學(xué)院典型培養(yǎng)物保藏委員會(huì)細(xì)胞庫(kù)。細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)中，A549細(xì)胞和16HBE細(xì)胞中分別加入SOCE抑制劑SKF96365或NiCl2。應(yīng)用羅氏公司W(wǎng)ST1細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒檢測(cè)24、48、72h的OD值，細(xì)胞增殖抑制率=1實(shí)驗(yàn)組OD值／正