依達(dá)拉奉對(duì)人肺腺癌A549細(xì)胞抗氧化損傷的作用研究.pdf

1、目的：建立人肺腺癌 A549細(xì)胞紫外氧化損傷的模型，通過(guò)依達(dá)拉奉對(duì)該紫外氧化損傷模型的處理，探討依達(dá)拉奉對(duì)人肺腺癌A549細(xì)胞抗氧化損傷的作用。
　　方法：1.將不同照射劑量的紫外線 UVC分組（UVC0組：0J/m2，UVC1組：10J/m2，UVC2組：20J/m2，UVC3組：40J/m2，UVC4組：80J/m2），分別照射人肺腺癌A549細(xì)胞，用MTT法測(cè)定各組的細(xì)胞存活率，從而確定A549細(xì)胞紫外氧化損傷模型的紫外線照

2、射劑量。
　　2.將不同濃度的依達(dá)拉奉溶液組（Eda0組：0μmol/l，Eda1組：10μmol/l，Eda2組：20μmol/l，Eda3組：40μmol/l，Eda4組：80μmol/l），分別對(duì)經(jīng)紫外照射損傷的A549細(xì)胞的培養(yǎng)，通過(guò)MTT法測(cè)定各組細(xì)胞的增殖率，以確定最佳的依達(dá)拉奉濃度。
　　3.將確定的紫外損傷劑量和依達(dá)拉奉的最佳濃度進(jìn)行細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，檢測(cè)A549細(xì)胞的氧化損傷程度。將實(shí)驗(yàn)細(xì)胞分組：空白對(duì)照組（空白組

3、），紫外損傷組（UVC組），紫外損傷+依達(dá)拉奉組（UVC+Eda組），采用紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)定細(xì)胞中的氧化指標(biāo)丙二醛（MDA）的含量、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-PX）的活性、超氧化物歧化酶（SOD）的活性。
　　4.用彗星實(shí)驗(yàn)檢測(cè)加入最佳濃度的依達(dá)拉奉對(duì)不同劑量紫外氧化損傷的A549細(xì)胞DNA的影響，分為A組（不同劑量UVC組）和B組（不同劑量UVC+依達(dá)拉奉組）。
　　結(jié)果：1.隨著紫外線照射劑量的增加，各組細(xì)胞的存

4、活率均呈下降的趨勢(shì)，經(jīng)MTT試驗(yàn)，確定進(jìn)行紫外線照射的劑量為40J/m2。
　　2.不同濃度的依達(dá)拉奉對(duì)經(jīng)紫外線照射損傷的A549細(xì)胞增殖率均有改善，Eda3組細(xì)胞的增殖率最大，確定最佳依達(dá)拉奉濃度為40μmol/l。
　　3.肺腺癌A549細(xì)胞抗氧化指標(biāo)測(cè)定：UVC組與UVC+Eda組的MDA含量均高于空白組，而UVC組與UVC+Eda組的SOD活性及GSH-PX活性均低于空白組；UVC+Eda組的MDA含量低于UVC組，

5、UVC+Eda組的SOD活性及GSH-PX活性均高于UVC組，其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。表明依達(dá)拉奉對(duì) A549細(xì)胞的抗氧化指標(biāo)具有明顯的改善作用。
　　4.紫外線照射會(huì)造成細(xì)胞DNA的損傷，照射劑量越大，DNA的損傷越大，當(dāng)紫外線照射劑量≤40J/m2時(shí)，B組的DNA損傷率低于A組，其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　結(jié)論：成功建立 A549細(xì)胞紫外線氧化損傷模型；依達(dá)拉奉對(duì)紫外線引起的人肺腺癌A549