依達(dá)拉奉對大鼠再植斷肢的保護(hù)作用.pdf

1、目的:本實驗通過建立大鼠斷肢再植模型,檢測依達(dá)拉奉對血清中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)及骨骼肌線粒體‘Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Atp酶活性的影響及光鏡、電鏡下骨骼肌結(jié)構(gòu)的改變,解明依達(dá)拉奉對大鼠再植后斷肢的保護(hù)作用。
　　 方法:清潔級健康雌性SD大鼠40只,隨機(jī)分為4組,每組10只:S組假手術(shù)組,M組斷肢再植模型組,E1組依達(dá)拉奉低劑量組,E2組依達(dá)拉奉高劑量組。M組:大鼠麻醉成功后固定,右后肢常規(guī)皮膚

2、消毒后沿股血管走行方向縱行切開皮膚,顯露并游離股動靜脈及股神經(jīng),鈍性分離各層組織,于右股骨中段水平切斷所有股部肌肉至股骨,只保留血管。右后肢驅(qū)血后以血管夾夾閉右側(cè)股動靜脈,室溫下放置3h,放松血管夾,形成再灌注,縫合肌肉、神經(jīng)及皮膚。術(shù)野用生理鹽水浸濕的無菌紗布覆蓋。再灌注前各組均由尾靜脈給予肝素鈉1000U/kg。E1、E2組除與M組上述操作相同外,于再灌注前分別由尾靜脈注射依達(dá)拉奉0.5mg/kg和1mg/kg。S組和M組給予等量的

3、生理鹽水。S組僅游離出股動靜脈,曠置3h后縫合皮膚。
　　 每組于再灌注5h和24h分別經(jīng)頸外靜脈取血各1ml,靜置后離心,測定血清超氧化物歧化酶(SOD)的活性及丙二醛(MDA)的含量。并于再灌注24h取右后肢腓腸肌,提取線粒體測定骨骼肌線粒體Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活性的變化。另取右后肢脛前肌在光鏡和電鏡下觀察骨骼肌的結(jié)構(gòu)變化。
　　 結(jié)果:40只大鼠全部進(jìn)入結(jié)果分析。
　　 1大體形態(tài)觀察

4、:S組右后肢肌肉、皮膚紅潤溫暖。M組右后肢肌肉、皮膚顏色稍暗紅,溫度稍低。E1組右后肢外觀改變較M組減輕。E2組右后肢外觀較M組有明顯的改善。
　　 2骨骼肌組織切片觀察:S組肌纖維基本正常,間質(zhì)無水腫,未見炎細(xì)胞浸潤。M組肌纖維結(jié)構(gòu)紊亂,崩解,血管擴(kuò)張充血,間質(zhì)水腫,有較多的炎性細(xì)胞浸潤。E1組肌纖維輕度水腫,間質(zhì)稍水腫,有炎細(xì)胞浸潤。E2組間質(zhì)稍水腫,肌間散在炎細(xì)胞浸潤。
　　 3透射電鏡觀察:S組肌原纖維排列整齊,

5、Z線清晰。線粒體嵴致密,膜完整,無腫脹。M組肌原纖維部分?jǐn)嗔?Z線較模糊,線粒體明顯腫脹,嵴紊亂,部分空泡化。E1組肌原纖維排列較整齊,Z線稍模糊,含有較多的脂滴,線粒體部分空泡化。E2組肌原纖維排列較整齊,Z線較清晰,含有少量脂滴,線粒體部分空泡化。
　　 4血清SOD活性及MDA含量:
　　 血清SOD活性:與S組比,M、E1、E2組SOD活性均降低(P＜0.05)。與M組比,E1、E2組SOD活性均升高(P＜0.0

6、5)。與E1組比,E2組SOD活性升高(P＜0.05)。再灌注24h時,M、E1、E2組SOD活性較5h時低。
　　 血清MDA含量:與S組比,M、E1、E2組MDA含量均升高(P＜0.05)。與M組比,E1、E2組MDA含量均降低(P＜0.05)。與E1組比,E2組MDA含量降低(P＜0.05)。再灌注24h時,M、E1、E2組MDA含量較5h時高。
　　 S組再灌注24h時上述兩指標(biāo)與再灌注5h時比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義

7、(P＞0.05)。
　　 5骨骼肌線粒體Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活性:與S組比,M、E1、E2組Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶均降低(P＜0.05)。與M組比,E1、E2組Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶均升高(P＜0.05)。與E1組比,E2組Na+-K+-ATP酶、Ca2+_ATP酶升高(P＜0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 1依達(dá)拉奉可減輕大鼠肢體缺血再灌注的損傷,對