低濃度哇巴因?qū)Π籽〖?xì)胞生長影響的實驗研究.pdf

1、目的:1.觀察低濃度哇巴因?qū)Σ煌籽≡?xì)胞及細(xì)胞株生長的影響，探討哇巴因用于白血病臨床治療的可行性；2.觀察鈉鉀ATP酶基礎(chǔ)表達(dá)及哇巴因?qū)Π籽〖?xì)胞鈉鉀ATP酶表達(dá)的影響情況。
　　 方法:原代白血病細(xì)胞及白血病細(xì)胞株培養(yǎng)；采用ＭＴＴ法檢測不同濃度（0.1、1、10nmol/L）哇巴因?qū)Π籽〖?xì)胞生長的調(diào)控作用；用流式細(xì)胞儀檢測低濃度（≤10nmol/L）哇巴因?qū)Π籽〖?xì)胞周期的影響；Western-blot檢測各白血病細(xì)胞

2、鈉鉀ATP酶α1亞單位在蛋白水平上的表達(dá)及低濃度（1、10nmol/L）哇巴因作用下的變化情況。
　　 結(jié)果:MTT方法檢測顯示：低濃度哇巴因作用24小時，巨核系白血病M07e、Meg-01細(xì)胞株增殖受抑；而淋巴系白血病 B95、Jhhan細(xì)胞株及原代白血病細(xì)胞的生長則出現(xiàn)增殖；作用均呈濃度依賴性。
　　 用流式細(xì)胞儀做進(jìn)一步檢測，結(jié)果表明低濃度哇巴因作用24h，使巨核系白血病M07e、Meg-01細(xì)胞株細(xì)胞周期阻滯于G

3、1期；使淋巴系白血病B95、Jhhan細(xì)胞株S期及G2/M期細(xì)胞比率增高。
　　 Western-blot結(jié)果顯示：巨核系白血病M07e、Meg-01細(xì)胞株的鈉鉀ATP酶α1亞單位基礎(chǔ)表達(dá)顯著低于其他細(xì)胞（P<0.01）；且經(jīng)低濃度哇巴因干預(yù)后，巨核系白血病細(xì)胞株鈉鉀ATP酶α1亞單位表達(dá)降低；而淋巴系白血病B95、Jhhan細(xì)胞株鈉鉀ATP酶α1亞單位的表達(dá)增高。
　　 結(jié)論:哇巴因在低濃度（≤10nmol/L）下，對