瑞舒伐他汀對糖尿病大鼠非對稱性二甲基精氨酸的影響的實驗研究.pdf

1、目的:
　　非對稱性二甲基精氨酸（ADMA）是一種內(nèi)源性的一氧化氮抑制物，導(dǎo)致動脈粥樣硬化、高血壓等血管疾病內(nèi)皮功能不全的重要因素，是內(nèi)皮功能受損及冠心病的獨立危險因素。本實驗的目的在于：1）建立高脂高糖飼料喂養(yǎng)配合鏈脲佐菌素(STZ)腹腔注射誘導(dǎo)的2型糖尿病大鼠模型；2）觀察糖尿病大鼠模型的血漿ADMA水平的變化以及內(nèi)皮形態(tài)及結(jié)構(gòu)的改變；3）觀察使用瑞舒伐他?。╮osuvastatain）（10mg/kg/d，8周）后對血漿非對

2、稱性二甲基精氨酸（ADMA）水平的以及內(nèi)皮形態(tài)和結(jié)構(gòu)的影響，并探討其可能的作用機制。
　　方法:
　　1.2型糖尿病動物模型的構(gòu)建
　　8周齡的SPF級雄性SD大鼠30只隨機抽取出8只使用普通飼料喂養(yǎng)，作為正常對照組。其余22只大鼠喂以含有10％白砂糖，12%豬油，2%膽固醇,0.5%膽鹽的高脂、高糖飼料。兩個月后，使用高脂、高糖飼料喂養(yǎng)的大鼠按30mg/kg的低劑量鏈脲佐菌素（臨用時配成鏈脲佐菌素緩沖液）進行單次腹腔

3、注射，正常對照組大鼠使用相同劑量的檸檬酸-檸檬酸鈉鈉緩沖液進行單次腹腔注射，1周后，尾靜脈采血測血糖值，以血糖高于16.7mmol/L為標(biāo)準(zhǔn)篩選實驗性2型糖尿病大鼠，共成模16只。將已做成糖尿病模型的大鼠隨機分成糖尿病組（8只），糖尿病瑞舒伐他汀干預(yù)組（8只），加之喂以普通飼料的8只大鼠。所有大鼠分為3組：（1）正常組（8只）；（2）糖尿病組（8只）；（3）瑞舒伐他汀組（8只）。
　　2．動物干預(yù)處理
　　正常組繼續(xù)喂以普通

4、飼料，糖尿病組及瑞舒伐他汀組繼續(xù)喂以高脂、高糖飼
　　料，各組均在SPF級環(huán)境下飼養(yǎng)，每天更換墊料及飲水。成模后一周內(nèi)反復(fù)抽查血糖，待血糖穩(wěn)定后，瑞舒伐他汀組按10mg.kg-1.d-1的劑量使用瑞舒伐他汀溶于蒸餾水中灌胃，正常對照組及糖尿病組給予等量蒸餾水灌胃，干預(yù)時間為8周。檢測空腹血糖、血清甘油三酯、總膽固醇、低密度和高密度脂蛋白及血漿ADMA水平，并在透射電鏡下觀察主動脈內(nèi)皮細胞結(jié)構(gòu)的改變。
　　結(jié)果:
　　1

5、.2型糖尿病動物模型的評價
　　高糖高脂飼料喂養(yǎng)8周后的20只大鼠腹腔注射STZ的大鼠出現(xiàn)典型的“多食、多飲、多尿、體重降低”的三多一少改變，其血糖值高于糖尿病的診斷標(biāo)準(zhǔn)：16.7mmol/L的有16只，建模成功率約72%。糖尿病組及瑞舒伐他汀組出現(xiàn)異常：與正常組比較，其TC（2.73±0.119，2.178±0.116 mmol/L VS1.945±0.255mmol/L）、TG（1.951±0.104，1.611±0.301m

6、mol/L VS1.472±0.216mmol/L）、LDL（1.762±0.984，1.268±0.105mmol/L VS0.499±0.152mmol/L）均明顯增高，P<0.05；HDL（0.57±0.135，0.834±0.008mmol/L VS1.208±0.166）則明顯降低，P>0.05。
　　2.血液生化改變：
　　2.1.血糖的改變：實驗干預(yù)8周后糖尿病組及瑞舒伐他汀組血糖均出現(xiàn)升高：糖尿病組（25.8

7、4±4.47mmol/L）、瑞舒伐他汀組（24.47±4.13mmol/L）較正常組（6.09±0.46 mmol/L）明顯升高，P<0.05。糖尿病組與瑞舒伐他汀組之間比較比較無差異，P>0.05。
　　2.2.血脂異常：實驗干預(yù)8周后瑞舒伐他汀組大鼠較糖尿病組明顯降低較糖尿病組大鼠相比，LDL（1.268±0.105 VS1.951±0.104）、TG（1.611±0.301 VS1.762±0.984）、TC（2.178±0

8、.116 VS2.73±0.119）均有明顯降低，P<0.05；而HDL（0.834±0.008 VS0.57±0.135）則有明顯增高，P<0.05。
　　2.3.ADMA比較：實驗干預(yù)8周后糖尿病組ADMA水平（608.903±12.853μmol/L）明顯高于對照組（416.553±9.334μmol/L）（P<0.05）；而瑞舒伐他汀組（514.101±21.03μmol/L）與糖尿病組相比，則明顯降低，P<0.05。

9、r>　　3.電鏡結(jié)果比較
　　與正常組比較，糖尿病組大鼠透射電鏡示內(nèi)皮細胞發(fā)生了腫脹、壞死、脫落等損傷性改變。而經(jīng)過瑞舒伐他汀干預(yù)的瑞舒伐他汀組其透射電鏡下內(nèi)皮細胞形態(tài)明顯改善。
　　結(jié)論:
　　1.大鼠高糖高脂飼料喂養(yǎng)2周后使用低劑量鏈脲佐菌素可致正常SD大鼠形成2型糖尿病模型。
　　2.此模型出現(xiàn)明顯的糖代謝、脂代謝紊亂，ADMA水平明顯增高，血管內(nèi)皮細胞壞死、脫落，其內(nèi)皮功能受到損傷。
　　3.瑞舒伐