P38MAPK信號(hào)通路抑制劑SB203580對(duì)肝細(xì)胞缺氧再灌注影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：研究P38MAPK抑制劑SB203580在人肝癌細(xì)胞系HepG2細(xì)胞缺氧再灌注過程中細(xì)胞增殖、遷移、侵襲和凋亡能力的作用,以及在人正常細(xì)胞系LO2細(xì)胞缺氧再灌注過程中細(xì)胞增殖和凋亡能力的作用。
　　方法1,四甲基偶氮唑藍(lán)比色(MTT)法測(cè)定不同藥物濃度及缺氧時(shí)間該藥物對(duì)HepG2細(xì)胞及LO2細(xì)胞增殖的影響;2,分別使用0.5μmol/L和0.1μmol/L的SB203580培養(yǎng)HepG2細(xì)胞及LO2細(xì)胞,Annexin V-

2、FITC/PI雙染實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞凋亡率的變化。3,分別應(yīng)用Western Blot、劃痕實(shí)驗(yàn)、Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)HepG2細(xì)胞中P38蛋白表達(dá)情況和細(xì)胞遷移、侵襲的變化。
　　結(jié)果：與正常培養(yǎng)細(xì)胞組相比,缺氧培養(yǎng)組HepG2細(xì)胞的凋亡率、P38MAPK磷酸化水平增加;SB203580+缺氧培養(yǎng)組 HepG2細(xì)胞的凋亡率相對(duì)于缺氧培養(yǎng)組增加,P38MAPK磷酸化水平降低;劃痕實(shí)驗(yàn)48 h后,缺氧對(duì)照組HepG2細(xì)胞明顯向劃痕的

3、中央遷移,而 SB203580+缺氧培養(yǎng)組 HepG2細(xì)胞遷移受到抑制;侵襲實(shí)驗(yàn)24 h后,SB203580+缺氧培養(yǎng)組 HepG2細(xì)胞的侵襲能力較缺氧對(duì)照組降低(P<0.05);AnnexinV-FITC/PI雙染實(shí)驗(yàn)顯示與缺氧對(duì)照組相比,LO2細(xì)胞SB203580+缺氧培養(yǎng)組凋亡率降低,而 HepG2細(xì)胞 SB203580+缺氧培養(yǎng)組凋亡率則增加(P<0.01);MTT結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)組 HepG2細(xì)胞和LO2細(xì)胞增殖抑制率受到影響,并