內(nèi)質(zhì)網(wǎng)分子伴侶PDIA3在非酒精性脂肪性肝病中的作用及機制研究.pdf

1、目的:非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD)是近年來影響人民生活健康的常見肝病之一。研究發(fā)現(xiàn)，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激(endoplasmic reticulumstress，ERS)在NAFLD發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮重要作用，其確切分子機制尚未明確。本課題旨在分析內(nèi)質(zhì)網(wǎng)分子伴侶蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶A3前體(protein disulfideisomerase A3 precursor，PDIA3

2、/ERp57)在NAFLD中的作用及分子機制。
　　方法:本研究運用軟脂酸(palmitic acid，PA)誘導(dǎo)人正常肝細胞系L02細胞建立NAFLD細胞模型。在此基礎(chǔ)上，采用小分子RNA干擾(siRNA)、免疫印記、細胞凋亡檢測等分子生物學(xué)手段，系統(tǒng)研究內(nèi)質(zhì)網(wǎng)分子伴侶PDIA3在NAFLD發(fā)生發(fā)展過程中的作用及分子機制。
　　結(jié)果:(1)用PA成功建立NAFLD細胞模型;(2)PDIA3在NAFLD細胞模型中表達上調(diào);(

3、3) NAFLD細胞模型中，siRNA抑制PDIA3表達后引起細胞脂交加重、凋亡增多;(4) NAFLD細胞模型中，siRNA抑制PDIA3表達后引起脂肪酸合成酶（fatty acid synthase，F(xiàn)AS）、磷酸化的PKR樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)調(diào)節(jié)激酶(phospho-PKR-like ER kinase，P-PERK)、葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78(glucose-regulatedprotein78，GRP78)和C/EBP同源蛋白(C/EBP ho