核桃多肽的制備條件優(yōu)化及其抗氧化活性研究.pdf

1、核桃在我國的栽培歷史悠久,核桃仁中含有蛋白質(zhì)、不飽和脂肪酸、VE、黃酮、葉酸、多酚類等多種物質(zhì),使之賦予了良好的保健功能。
　　鑒于核桃油中含有高達(dá)90％的不飽和脂肪酸,人們已經(jīng)成功開發(fā)出了優(yōu)質(zhì)核桃油并投放市場。然而,目前多數(shù)廠家將去油后的核桃粕作為飼料處理,未能充分發(fā)掘其應(yīng)有的價(jià)值。倘若將其制備成核桃多肽,不僅能夠變廢為寶,還能為保健市場增添一個(gè)新的多肽產(chǎn)品。
　　本文首先進(jìn)行了不同產(chǎn)地、不同品種核桃仁組分的分析,以選擇最

2、佳品種的核桃粕蛋白作為核桃肽研制的原料。用凱氏定氮法、DNS法、索氏抽提法測定了不同產(chǎn)地5個(gè)品種核桃仁中的總蛋白、總糖和脂肪的含量。采用氣相色譜法檢測了它們核桃油中脂肪酸的種類與含量。就蛋白質(zhì)含量而言,美國霍華德、新疆新光、汾陽中林1號(hào)、甘肅周至隔年、云南娘青核桃仁中蛋白質(zhì)含量分別為17.46%,19.3%,19.41%,17.61%,16.84%。故選擇蛋白質(zhì)含量最高的汾陽中林1號(hào)核桃粕作為核桃肽制備的原料。
　　本文優(yōu)化了酶法

3、制備核桃肽的工藝。首先,優(yōu)化了堿溶酸沉法提取核桃蛋白的條件。在堿溶過程中,根據(jù)單因素試驗(yàn)結(jié)果,選擇最適攪拌時(shí)間為60min。用響應(yīng)面試驗(yàn)對(duì)溫度、液固比、pH值等因素進(jìn)行優(yōu)化,得到的最佳堿溶條件是:pH值為10.67,溫度為57.17℃,液固比為89.99mL/g,其最大提取率為96.6485%。驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果與該值較接近,表明所建模型正確。核桃蛋白酸沉pH值根據(jù)單因素試驗(yàn)的結(jié)果確定為5。
　　然后,優(yōu)化中性蛋白酶制備核桃多肽的工藝。

4、以酶濃度、底物濃度、pH值、溫度、水解時(shí)間為影響因素,采用響應(yīng)面法優(yōu)化水解工藝,得到模型的最優(yōu)解為:水解時(shí)間為3.5h,酶濃度9999.99U/g,底物濃度10%,溫度50.07℃,pH值7.21,水解度達(dá)到11.9986%。驗(yàn)證試驗(yàn)測得水解度的平均值為11.7277%,與預(yù)測值較相近。預(yù)計(jì)核桃肽的平均分子量小于2000Da。
　　依照優(yōu)化的條件提取核桃蛋白、酶解制備多肽、超濾過膜(2000 Da和5000Da聚礬纖維膜)、濃縮、

5、噴霧干燥,分別得到兩種核桃多肽樣品,即樣品1和樣品2。在體外抗氧化功能試驗(yàn)中,檢測了它們清除超氧陰離子自由基(O2.-)、羥自由基(HO.)的能力和還原能力,結(jié)果表明:兩個(gè)核桃多肽樣品均有抗氧化活性,而且三種抗氧化作用的強(qiáng)弱具有一致性。比較二者,樣品1的抗氧化活性更強(qiáng)一些。然后,用樣品1進(jìn)行小鼠體內(nèi)抗氧化試驗(yàn)。按照《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范實(shí)施手冊》中抗氧化活性檢測方法測定了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血中谷胱甘肽過氧化物酶(GXH-Px)的活性及血液和