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1、目的：構(gòu)建穩(wěn)定表達(dá)人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子 VEGF-165的人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞株（hMSCs）并檢測(cè)經(jīng)基因轉(zhuǎn)染后外源基因的表達(dá)，為進(jìn)一步研究利用hVEGF基因轉(zhuǎn)染的hMSCs 在心肌梗塞動(dòng)物模型中作用打下基礎(chǔ)。 方法：首先是hVEGF165 和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染質(zhì)粒pcPGK- hVEGF 165的構(gòu)建，利用脂質(zhì)體介導(dǎo)轉(zhuǎn)染hMSCs，然后進(jìn)行陽性細(xì)胞克隆篩選，用RT-PCR、 Real time PCR、Western Blot、 ELI
2、SA 的方法檢測(cè) hVEGF165在hMSCs中的表達(dá)。 結(jié)果：擴(kuò)增VEGF后成功構(gòu)建質(zhì)粒 pcPGK-hVEGF165，并利用脂質(zhì)體順利轉(zhuǎn)染進(jìn)hMSCs，并篩選穩(wěn)定表達(dá)的細(xì)胞株。RT-PCR、 Real time PCR檢測(cè)結(jié)果顯示在MSCs（VEGF165）表達(dá)的VEGF165信使RNA明顯高于對(duì)照及未轉(zhuǎn)染的hMSCs，而Western Blot、ELISA檢測(cè)結(jié)果顯示hMSCs（VEGF165）細(xì)胞及培養(yǎng)上清中的VEGF蛋
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