ERCC1基因C19007T多態(tài)性與大腸癌中MRP、GST-π、P-gp和LRP表達(dá)的相關(guān)研究.pdf

1、目的:
　　大腸癌是我國高發(fā)的消化系統(tǒng)的惡性腫瘤之一,近些年來,其發(fā)病率及死亡率均逐漸上升,且發(fā)病年齡有年輕化的趨勢。手術(shù)結(jié)合化療是臨床上治療大腸癌的主要措施,而對于那些已經(jīng)錯失手術(shù)機(jī)會的晚期患者來說,化療可能成為其唯一的治療手段?；熌軌蛴行У匾种拼竽c癌的復(fù)發(fā)、防止發(fā)生轉(zhuǎn)移,故化療的成敗與否直接將影響患者的預(yù)后情況。近年研究顯示,多藥耐藥相關(guān)蛋白(Multidrug resistance-associated protein,M

2、RP)、谷胱甘肽-巰基-轉(zhuǎn)移酶-π(glutathione-s-transferase-π,GST-π)、P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)和肺耐藥蛋白(Lung resistance protein,LRP)可以誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞發(fā)生多藥耐藥,改變腫瘤細(xì)胞對化療藥物的敏感性,從而影響化療的療效。同時,核苷酸切除修復(fù)交叉互補(bǔ)基因1(excision repair cross completion gene1,ERCC1)的多

3、態(tài)性與鉑類藥物的耐藥、化療療效的預(yù)測及預(yù)后的判定密切相關(guān)。我們試圖通過研究確定ERCC1基因C19007T位點(diǎn)不同基因型的大腸癌患者中多藥耐藥相關(guān)蛋白、谷胱甘肽-巰基-轉(zhuǎn)移酶-π、P-糖蛋白和肺耐藥蛋白的表達(dá)情況,闡明 ERCC1基因 C19007T多態(tài)性與大腸癌中多種耐藥蛋白之間的關(guān)系,以期為臨床上判定ERCC1基因 C19007T位點(diǎn)的不同基因型大腸癌患者的化療敏感性提供客觀的參考指標(biāo),也為制定合理的個體性化療方案提供理論依據(jù)。

4、r>　　方法:
　　隨機(jī)選取86例大腸癌患者手術(shù)后的切除標(biāo)本和52例遠(yuǎn)端正常組織(距癌灶>10cm),采用免疫組織化學(xué)技術(shù)(S-P法)檢測86例大腸癌組織和52例遠(yuǎn)端正常組織(距癌灶>10cm)中MRP、GST-π、P-gp和LRP的表達(dá)情況,分析其與大腸癌的各臨床病理特征間(包括性別、年齡、腫瘤大小、分化程度、發(fā)病部位、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移)的關(guān)系;同時將獲取的86例組織標(biāo)本于-80℃保存,使用TIANamp Genomic DNA提

5、取試劑盒提取標(biāo)本中的DNA,采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)-限制性片段長度多態(tài)性(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)技術(shù)檢測86例大腸癌患者ERCC1基因C19007T位點(diǎn)的基因型,并分析ERCC1基因C19007T多態(tài)性與大腸癌中MRP、GST-π、P-gp和LRP表達(dá)情況的關(guān)系。
　　結(jié)果:
　　PCR-RFLP分析

6、技術(shù)結(jié)果顯示:ERCC1基因 C19007T位點(diǎn)基因型頻率分別為C/C型占53.49％(46/86)、C/T型占40.70%(35/86)以及T/T型占5.81%(5/86)。免疫組化結(jié)果顯示:86例大腸癌組織中,MRP陽性表達(dá)率為45.3%,GST-π陽性表達(dá)率為72.09%,P-gp陽性表達(dá)率為79.07%,LRP陽性表達(dá)率為76.7%,四者在大腸癌組織中表達(dá)均高于在遠(yuǎn)端正常組織中的表達(dá)(P<0.05)。MRP的表達(dá)與大腸癌分化程度

7、有關(guān),分化較低組的陽性率(61.0%)高于分化較高組的陽性率(31.1%),兩組比較差異有顯著性(P<0.01)。P-gp的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān),有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的陽性率(87.76%)高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的陽性率(67.57%),兩組比較差異有顯著性（P<0.05)。其中,GST-π在C/T+ T/T基因型組的陽性表達(dá)率為85.00%,高于在C/C基因型組的陽性表達(dá)率60.87%,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。LRP在C/T+ T/

8、T基因型組的陽性表達(dá)率為90.00%,高于在C/C基因型組的陽性表達(dá)率65.22%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。比較MRP、P-gp在兩組間的表達(dá),差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　結(jié)論:
　　1.MRP、GST-π、P-gp和LRP在大腸癌組織中均有不同程度的高表達(dá),可能與大腸癌原發(fā)性多藥耐藥有關(guān)。
　　2.大腸癌組織中MRP的表達(dá)可能與患者的性別、年齡、腫瘤大小、發(fā)病部位、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均無關(guān)(P>0