胃印戒細胞癌胃、腸表型分型及其與K-ras基因突變和預后的相關性研究.pdf

1、目的:
　　1)了解胃印戒細胞癌黏液分泌性狀、數量和分布,探討?zhàn)ひ寒愘|性表達的機制及其生物學意義。
　　2)探討胃、腸表型分型及其與K-ras基因突變和預后的相關性,評價K-ras基因突變作為胃印戒細胞癌分子靶向治療靶點的可行性,為胃印戒細胞癌患者的治療、預后評價提供有力的理論依據。
　　方法:
　　1)電話隨訪2000年～2008年在我院行胃癌根治術的胃印戒細胞癌患者163例,調查患者的生存狀況,了解死亡患者的

2、死亡時間和死亡原因。
　　2)對163例癌組織和30例正常胃黏膜組織行黏液組化染色,檢測兩組中黏液表型表達狀況;同時結合免疫組化Envision法檢測胃黏膜上皮免疫表型標記MUC1、MUC5AC、MUC6和腸黏膜上皮免疫表型標記MUC2、CDX2的表達水平,并根據腫瘤細胞胃、腸黏膜上皮免疫表型標記物表達水平的差異,將胃印戒細胞癌分為三種類型:胃型印戒細胞癌(只表達胃免疫表型標記),腸型印戒細胞癌(只表達腸免疫表型標記),混合型印戒

3、細胞癌(同時表達胃免疫表型和腸免疫表型標記)。
　　3)抽提腫瘤組織基因組DNA,PCR-DNA直接測序方法檢測163例癌組織中K-ras基因第12、13和61密碼子突變狀況。
　　結果:
　　1)163例患者有143例獲得隨訪資料,隨訪率87.7％。62例患者生存,81例患者死亡。
　　2)癌組織形態(tài)學觀察查見Ⅰ型印戒細胞癌137例,Ⅲ型印戒細胞癌26例,無其他三種類型發(fā)現。
　　3)163例癌組織和30

4、例正常胃黏膜組織內中性黏液、唾液酸黏液和硫酸黏液檢出率分別為69.9％(114/163)、42.3％(69/163)、19％(31/163)和100％(30/30)、0％(0/30)、0％(0/30);兩組中MUC1、MUC5AC、MUC6、MUC2、CDX2的陽性表達率分別為20.9％(34/163)、73.6％(120/163)、28.8％(47/163)、46.6％(76/163)、39.3％(64/163)和50％(15/30)

5、、80％(24/30)、60％(18/30)、0％(0/30)、0％(0/30)。
　　4)中性黏液、唾液酸黏液和硫酸黏液檢出率兩組間均有顯著性差異(均P＜0.05);MUC1、MUC6、MUC2和CDX2的陽性表達率兩組間均有顯著性差異(均P＜0.05);MUC5AC的陽性表達率兩組間無顯著性差異(P＞0.05)。
　　5)中性黏液更多見于腫塊≤5.0cm病例,唾液酸黏液更多見于腫塊＞5.0cm患者;黏膜內癌中性黏液檢出率

6、顯著高于黏膜下層浸潤癌(P＜0.05),相反,黏膜內癌唾液酸黏液和硫酸黏液檢出率顯著低于黏膜下層浸潤癌(均P＜0.05);淋巴結轉移組中性黏液檢出率顯著低于無淋巴結轉移組(P＜0.05),而唾液酸黏液檢出率顯著高于無淋巴結轉移組(P＜0.05);(Ⅰ+Ⅱ)期癌組織內中性黏液檢出率明顯高于(Ⅲ+Ⅳ)期(P＜0.05),而唾液酸黏液檢出率則顯著低于(Ⅲ+Ⅳ)期(P＜0.05)。
　　6)胃、腸表型標記表達水平與印戒細胞癌形態(tài)學分型無相

7、關性(P＞0.05)。
　　7)MUC2陽性表達與腫瘤浸潤深度和淋巴結轉移呈正相關性(P=0.001和P=0.002);CDX2陽性表達與腫瘤大小、浸潤深度以及腫瘤TNM分期呈正相關(P=0.004和P=0.001);MUC5AC陽性表達與腫瘤浸潤深度呈負相關(P=0.001)。
　　8)根據胃、腸上皮免疫表型表達差異,查見胃型印戒細胞癌、混合型印戒細胞癌、腸型印戒細胞癌分別為63例(38.6％)、71例(43.5％)、29

8、例(17.9％)。
　　9)腸型印戒細胞癌更多見于腫塊＞5.0cm、有黏膜下層浸潤、淋巴結轉移和(Ⅲ+Ⅳ)期的病例中(均P＜0.01)。
　　10)163例癌組織中,K-ras基因突變率為12.27％(20/163),所有突變位點均位于12密碼子,突變類型包括:GGT→GTT(8例),GGT→GAT(10例),GGT→AGT(1例),GGT→TGT(1例)。13和61密碼子未檢出突變。
　　11)K-ras基因突變更多

9、見于MUC5AC陰性、MUC6陰性以及腸型印戒細胞癌中。
　　12)生存分析顯示,MUC2陽性患者中位生存期明顯低于MUC2陰性患者(P＜0.05);非胃型(腸型和混合型)印戒細胞癌患者中位生存期明顯低于胃型印戒細胞癌(P＜0.05)。
　　13)單因素分析顯示腫瘤浸潤深度和MUC2陽性表達與預后相關(均P＜0.05),腫瘤大小、患者年齡、淋巴結轉移等因素與預后無相關性。多因素分析顯示腫瘤浸潤深度和MUC2陽性表達可以作為獨

10、立的預后因素(P＜0.05)。
　　結論:
　　1)胃、腸表型標記及其分型與胃印戒細胞癌的生物學行為和預后密切相關,腸型胃印戒細胞癌臨床生物學行為和預后均較胃型印戒細胞癌差,該分型彌補了傳統形態(tài)學分型的不足。建立統一的、科學合理的免疫表型分型標準,對印戒細胞癌有重要價值。
　　2)本研究首次發(fā)現在胃印戒細胞癌中,K-ras基因突變率為12.27％,12密碼子是突變熱點。
　　3)K-ras基因突變更多見于腸型病例