蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白VvSUC11、VvSUC12在提高甜菜含糖量中的功能研究.pdf

1、目的:
　　甜菜是重要的糖用作物,塊根中蔗糖含量的高低是其品質(zhì)的決定因子。為了研究蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白是否能提高甜菜的含糖量,利用基因工程技術(shù)將葡萄蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因(VvSUC11和VvSUC12)導(dǎo)入甜菜塊根中,用于分析葡萄蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因在增加甜菜含糖量中作用。
　　方法:
　　將利用葡萄蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白VvSUC11和VvSUC12基因構(gòu)建的根特異性表達(dá)的植物雙價(jià)表達(dá)載體(pCAMBIA2301-SP1-VvSUC11-SP

2、2-VvSUC12),通過(guò)農(nóng)桿菌介導(dǎo)法轉(zhuǎn)化到甜菜(Beta vulgarisL.)品種KWS-9103中。利用PCR和RT-PCR技術(shù)檢測(cè)目的基因是否整合到甜菜并表達(dá)。將獲得的轉(zhuǎn)基因甜菜和對(duì)照甜菜生根并移栽大田后,對(duì)其葉片性狀、相關(guān)的生理指標(biāo)、塊根重和含糖量進(jìn)行測(cè)定。
　　結(jié)果:
　　結(jié)果表明,通過(guò)PCR和RT-PCR檢測(cè)獲得13株轉(zhuǎn)基因甜菜。測(cè)得轉(zhuǎn)基因植株葉長(zhǎng)、葉寬、葉柄長(zhǎng)和葉片數(shù)量平均分別25.16 cm、19.31 c

3、m、29.17 cm和38.33個(gè),與對(duì)照相比,葉寬增加31.81％,葉柄縮短16.61%,葉片數(shù)目增加17.04%,都存在極顯著差異,而葉長(zhǎng)增加1.68%,無(wú)顯著差異;葉綠素a含量(1.31 mg·g-1)、葉綠素b含量(0.562 mg·g-1)和葉綠素總含量(1.87 mg·g-1)與對(duì)照無(wú)顯著差異;葉中可溶性糖含量(14.59 mg·g-1)降低13.04%,與對(duì)照(16.51 mg·g-1)存在極顯著差異,葉柄中可溶性糖含量(

4、21.90 mg·g-1)增加3.36%,但與對(duì)照(21.6 mg·g-1)差異不顯著;單株轉(zhuǎn)基因甜菜的塊根重和含糖量分別平均為3.067 kg和183.2 g·kg-1,與對(duì)照(2.894 kg)相比,塊根增重5.91%,差異不顯著,含糖量增加9.41%,與對(duì)照(167.5 g·kg-1)存在顯著差異。說(shuō)明轉(zhuǎn)基因甜菜葉面積和葉片數(shù)的增加,擴(kuò)大了其光合葉面積,同時(shí)葉柄縮短有利于提高糖分子從源葉到庫(kù)的轉(zhuǎn)運(yùn),促進(jìn)甜菜塊根的形成和加快糖分的積