PPARγ對(duì)PCOS大鼠模型卵巢間質(zhì)M2型巨噬細(xì)胞分布的影響.pdf

1、第一部分 P COS大鼠模型的構(gòu)建以及吡格列酮抑制PC OS大鼠模型的構(gòu)建
　　目的：
　　1.構(gòu)建脫氫表雄酮（DHEA）誘導(dǎo)的幼年雌性 Wistar大鼠多囊卵巢綜合征（PCOS）模型。
　　2.探討吡格列酮是否影響DHEA誘導(dǎo)的PCOS大鼠模型的構(gòu)建。
　　方法：選取21日齡雌性Wistar大鼠40只，隨機(jī)數(shù)分成PCOS模型組（P組）、對(duì)照組（C組）、吡格列酮(艾可拓，Ac tos)干預(yù)組（P A組）和吡格列酮

2、組（A組）,每組10只。P組大鼠于每日晨8時(shí)頸背部皮下注射 DHEA6mg/100 g+0.2 ml注射用無(wú)菌大豆油；C組大鼠于同時(shí)間頸背部皮下注射0.2 ml注射用無(wú)菌大豆油； PA組大鼠于同時(shí)間頸背部皮下注射DHEA6mg/100g+0.2ml注射用無(wú)菌大豆油，同時(shí)行吡格列酮生理鹽水溶液5mg/k g灌胃；A組大鼠于同時(shí)間行吡格列酮生理鹽水溶液5 mg/k g灌胃，連續(xù)干預(yù)20天。于干預(yù)的后10天連續(xù)行陰道涂片，觀察各組大鼠動(dòng)情周期

3、的變化。干預(yù)結(jié)束后，測(cè)定血清睪酮（T）、空腹血糖(FBG)和空腹胰島素（FINS）并計(jì)算胰島素抵抗指數(shù)（HOMA-IR）；卵巢組織切片行蘇木素伊紅（HE）染色，觀察其形態(tài)學(xué)變化。
　　結(jié)果：
　　1.PCOS模型組大鼠失去規(guī)律的動(dòng)情周期，而對(duì)照組大鼠具有規(guī)律的動(dòng)情周期。與對(duì)照組相比，PCOS模型組大鼠 T、FINS和 HOMA-IR顯著升高，而 FBG無(wú)顯著差異。PCOS模型組大鼠卵巢組織切片 HE染色示多個(gè)囊狀擴(kuò)張的卵泡，

4、其顆粒細(xì)胞層數(shù)減少甚至消失，另外發(fā)育階段卵泡數(shù)目明顯減少；對(duì)照組可見(jiàn)多個(gè)不同發(fā)育階段的卵泡，未見(jiàn)囊狀擴(kuò)張的卵泡。
　　2.與PCOS模型組相比，吡格列酮干預(yù)組大鼠T、FINS和HOMA-IR顯著降低，而 FBG無(wú)顯著差異；并且表現(xiàn)規(guī)律的動(dòng)情周期。吡咯列酮干預(yù)組大鼠卵巢組織切片 HE染色可見(jiàn)多個(gè)不同發(fā)育階段的卵泡，未見(jiàn)囊狀擴(kuò)張的卵泡。
　　結(jié)論：1.DHEA誘導(dǎo)的幼年雌性 Wistar大鼠 PCOS模型卵巢形態(tài)以及血液內(nèi)分泌改

5、變與PCOS患者相似，是研究PCOS發(fā)病機(jī)制理想的動(dòng)物模型。
　　2.吡格列酮可抑制DHEA誘導(dǎo)的PCOS大鼠模型的構(gòu)建。
　　第二部分吡格列酮對(duì)PC OS大鼠模型卵巢間質(zhì)細(xì)胞PP ARγ表達(dá)以及卵巢間質(zhì)M2型巨噬細(xì)胞分布的影響
　　（一）吡咯列酮對(duì)PCO S大鼠模型卵巢間質(zhì)細(xì)胞PP ARγ表達(dá)的影響
　　目的：探討吡格列酮是否影響 DHEA誘導(dǎo)的PCOS大鼠模型卵巢間質(zhì)細(xì)胞PPARγ的表達(dá)。
　　方法：將

6、第一部分獲得的各組卵巢組織石蠟切片行免疫組織化學(xué)染色，使用Image Pro Plus6.0（IPP）圖像分析軟件測(cè)量卵巢間質(zhì)細(xì)胞PPARγ染色的平均光密度，使用SPSS20統(tǒng)計(jì)分析軟件對(duì)測(cè)量結(jié)果進(jìn)行t檢驗(yàn)。
　　結(jié)果： PCOS模型組大鼠卵巢間質(zhì)細(xì)胞 PPARγ平均光密度較對(duì)照組和吡咯列酮干預(yù)組顯著降低；吡格列酮干預(yù)組大鼠卵巢間質(zhì)細(xì)胞PPARγ平均光密度與吡格列酮組無(wú)顯著性差異；對(duì)照組大鼠卵巢間質(zhì)細(xì)胞PPARγ平均光密度與吡格列

7、酮組無(wú)顯著性差異。
　　結(jié)論：
　　1.正常大鼠單用吡格列酮不影響卵巢間質(zhì)細(xì)胞PPARγ的表達(dá)。
　　2.吡格列酮可增加 DHEA誘導(dǎo)的PCOS大鼠模型卵巢間質(zhì)細(xì)胞 PPARγ的表達(dá)。
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　　目的：探討吡格列酮是否影響DHEA誘導(dǎo)的PCOS大鼠模型卵巢間質(zhì)M2型巨噬細(xì)胞的分布。
　　方法：將第一部分獲得的各組卵巢組織切片行免疫組織化

8、學(xué)染色，計(jì)數(shù)卵巢間質(zhì) M2型巨噬細(xì)胞分布數(shù)量，從而獲得每組大鼠卵巢間質(zhì)單個(gè)高倍鏡下 M2型巨噬細(xì)胞分布的平均數(shù)量，使用SPSS20統(tǒng)計(jì)分析軟件對(duì)結(jié)果進(jìn)行t檢驗(yàn)。
　　結(jié)果：PCOS模型組大鼠卵巢間質(zhì) M2型巨噬細(xì)胞數(shù)較對(duì)照組和吡格列酮干預(yù)組顯著減少；吡格列酮干預(yù)組大鼠卵巢間質(zhì) M2型巨噬細(xì)胞數(shù)與吡格列酮組無(wú)顯著性差異；對(duì)照組大鼠卵巢間質(zhì) M2型巨噬細(xì)胞數(shù)與吡格列酮組無(wú)顯著性差異。
　　結(jié)論：
　　1.正常大鼠單用吡格列