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文檔簡介
1、目的:本研究以高脂飲食誘導(dǎo)為糖尿病前期高胰島素血癥狀態(tài)的KKay小鼠為糖尿病試驗(yàn)動(dòng)物模型,通過給予游泳運(yùn)動(dòng)生活方式和DPP-4I(西格列汀)藥物干預(yù),觀察KKay小鼠體脂分布的變化,血清chemerin、adiponectin水平和脂肪組織chemerin及其受體CMKLR1表達(dá)的變化,旨在探討早期不同干預(yù)方式對糖尿病模型小鼠體脂分布和脂肪因子表達(dá)的影響。
方法:本研究包括三個(gè)部分:
1.試驗(yàn)?zāi)P偷慕⑴c不同干預(yù)對K
2、Kay小鼠影響的一般情況分析:
?、臟Kay小鼠糖尿病前期-高胰島素血癥狀態(tài)模型的建立:研究對象為4周齡8只雄性C57BL/6j(C57)小鼠作為對照組,16只雄性KKay小鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后隨機(jī)分為普通飲食組和高脂飲食誘導(dǎo)組。檢測指標(biāo)如下:每周測體重;每周監(jiān)測空腹及隨機(jī)血糖;測空腹胰島素水平;每周行OGTT試驗(yàn),并測120分鐘時(shí)血清胰島素水平。
?、撇煌深A(yù)對KKay小鼠影響的一般情況分析:研究對象為4周齡10只雄性C
3、57小鼠作為對照組,48只雄性KKay小鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后隨機(jī)分為普通飲食組、高脂飲食組、游泳運(yùn)動(dòng)組和西格列汀組。5周開始給予高脂飲食誘導(dǎo)2周,7周起除高脂飲食組繼續(xù)給予高脂飲食喂養(yǎng)外,其余組均給予普通飲食喂養(yǎng)。檢測指標(biāo):同上,于7周和15周齡時(shí)行OGTT及IPITT試驗(yàn)并測空腹胰島素。
2.游泳運(yùn)動(dòng)及西格列汀干預(yù)對KKay小鼠體脂分布的影響:15周齡時(shí)取附睪脂肪、網(wǎng)膜脂肪、腎周脂肪、皮下脂肪稱重,通過HE染色觀察各組小鼠脂肪
4、組織脂肪細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化。
3.游泳運(yùn)動(dòng)及西格列汀干預(yù)對KKay小鼠脂肪因子的影響:7周齡和15周齡時(shí)取血用ELISA方法測血清chemerin、adiponectin濃度。用RT-PCR方法測定OAT和SAT chemerin及其受體CMKLR1的表達(dá),觀察其在不同試驗(yàn)組表達(dá)的變化。
結(jié)果:
1.⑴與C57對照組和KKay普通飲食組相比,高脂飲食組KKay小鼠在7周齡時(shí),其體重、空腹胰島素、OGTT2h胰島
5、素、OGTT試驗(yàn)血糖AUC曲線下面積明顯升高,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p<0.05);但空腹血糖水平無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,隨機(jī)血糖也均<16.7mmol/L。因此,KKay小鼠在高脂誘導(dǎo)2周7周齡時(shí)開始出現(xiàn)高胰島素血癥。
⑵15周齡時(shí),KKay游泳運(yùn)動(dòng)組和西格列汀組與普通飲食組和高脂飲食組相比,體重、空腹及隨機(jī)血糖明顯下降,空腹胰島素水平明顯上升;與C57普通飲食組相比,體重、空腹及隨機(jī)血糖無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。OGTT試驗(yàn)顯示與KKay普通飲食和高
6、脂飲食組相比,游泳運(yùn)動(dòng)和西格列汀組血糖曲線下面積明顯下降(p<0.01);IPITT試驗(yàn)顯示與KKay高脂飲食組相比,游泳運(yùn)動(dòng)和西格列汀組血糖曲線下面積明顯下降。
2.⑴與KKay高脂飲食組相比,游泳運(yùn)動(dòng)和西格列汀組EAT、OAT和PAT各部位脂肪組織重量明顯下降(p<0.01),EAT、OAT和PAT各部位脂肪組織重量與體重比也明顯下降(p<0.05)。
⑵各部位脂肪組織脂肪細(xì)胞平均最大直徑:與C57普通飲食及KK
7、ay普通飲食組相比,KKay高脂飲食組各部位脂肪細(xì)胞平均最大直徑明顯增大(p<0.01);與KKay普通飲食及高脂飲食組相比,KKay游泳運(yùn)動(dòng)和西格列汀組各部位脂肪細(xì)胞平均最大直徑明顯減小(p<0.01)。
3.KKay游泳運(yùn)動(dòng)和西格列汀組血清chemerin水平高于KKay高脂飲食組,而adiponectin水平低于KKay高脂飲食組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。KKay高脂飲食組OAT和SAT chemerin mR
8、NA表達(dá)水平高于C57普通飲食組和KKay普通飲食組;KKay游泳運(yùn)動(dòng)組和西格列汀組OAT和SAT chemerin mRNA表達(dá)水平明顯低于KKay普通飲食組和高脂飲食組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。在OAT,CMKLR1 mRNA顯示出與chemerin mRNA類似的變化趨勢,而在SAT,KKay高脂飲食組CMKLR1 mRNA高于C57普通飲食組,KKay各組CMKLR1 mRNA表達(dá)無明顯差異。
結(jié)論:
9、 1.KKay小鼠在發(fā)展為2型糖尿病的過程中,內(nèi)臟脂肪量與皮下脂肪量均有不同程度的增加。
2.運(yùn)動(dòng)生活方式和西格列汀藥物早期干預(yù)可明顯減輕總體脂量。運(yùn)動(dòng)干預(yù)可能減少內(nèi)臟脂肪量更多,而西格列汀藥物干預(yù)可能減少皮下脂肪量更多。
3.血清chemerin、adiponectin水平的變化在一定程度上可反映糖代謝狀況。
4.在發(fā)展為糖尿病的過程中,網(wǎng)膜脂肪組織chemerin及其受體CMKLR1 mRNA的表達(dá)增
10、加,并且網(wǎng)膜脂肪組織chemerin mRNA表達(dá)水平高于皮下脂肪組織,提示內(nèi)臟脂肪組織可能是血清chemerin的主要來源。
5.在網(wǎng)膜脂肪組織CMKLR1的變化趨勢與chemerin一致,而在皮下脂肪組織KKay各組小鼠CMKLR1的表達(dá)無明顯差異,考慮chemerin及其受體CMKLR1在內(nèi)臟脂肪發(fā)揮的生物學(xué)作用大于皮下脂肪組織。
6.在糖尿病前期高胰島素血癥狀態(tài)給予運(yùn)動(dòng)生活方式和和DPP-4I(西格列汀)藥物
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