運動及DPP-4抑制劑干預對糖尿病前期高胰島素狀態(tài)KKay小鼠體脂分布和脂肪因子表達的影響.pdf

1、目的:本研究以高脂飲食誘導為糖尿病前期高胰島素血癥狀態(tài)的KKay小鼠為糖尿病試驗動物模型,通過給予游泳運動生活方式和DPP-4I(西格列汀)藥物干預,觀察KKay小鼠體脂分布的變化,血清chemerin、adiponectin水平和脂肪組織chemerin及其受體CMKLR1表達的變化,旨在探討早期不同干預方式對糖尿病模型小鼠體脂分布和脂肪因子表達的影響。
　　方法:本研究包括三個部分:
　　1.試驗模型的建立與不同干預對K

2、Kay小鼠影響的一般情況分析:
　　⑴KKay小鼠糖尿病前期-高胰島素血癥狀態(tài)模型的建立:研究對象為4周齡8只雄性C57BL/6j(C57)小鼠作為對照組,16只雄性KKay小鼠適應性喂養(yǎng)1周后隨機分為普通飲食組和高脂飲食誘導組。檢測指標如下:每周測體重;每周監(jiān)測空腹及隨機血糖;測空腹胰島素水平;每周行OGTT試驗,并測120分鐘時血清胰島素水平。
　?、撇煌深A對KKay小鼠影響的一般情況分析:研究對象為4周齡10只雄性C

3、57小鼠作為對照組,48只雄性KKay小鼠適應性喂養(yǎng)1周后隨機分為普通飲食組、高脂飲食組、游泳運動組和西格列汀組。5周開始給予高脂飲食誘導2周,7周起除高脂飲食組繼續(xù)給予高脂飲食喂養(yǎng)外,其余組均給予普通飲食喂養(yǎng)。檢測指標:同上,于7周和15周齡時行OGTT及IPITT試驗并測空腹胰島素。
　　2.游泳運動及西格列汀干預對KKay小鼠體脂分布的影響:15周齡時取附睪脂肪、網膜脂肪、腎周脂肪、皮下脂肪稱重,通過HE染色觀察各組小鼠脂肪

4、組織脂肪細胞形態(tài)學變化。
　　3.游泳運動及西格列汀干預對KKay小鼠脂肪因子的影響:7周齡和15周齡時取血用ELISA方法測血清chemerin、adiponectin濃度。用RT-PCR方法測定OAT和SAT chemerin及其受體CMKLR1的表達,觀察其在不同試驗組表達的變化。
　　結果:
　　1.⑴與C57對照組和KKay普通飲食組相比,高脂飲食組KKay小鼠在7周齡時,其體重、空腹胰島素、OGTT2h胰島

5、素、OGTT試驗血糖AUC曲線下面積明顯升高,具有統(tǒng)計學差異(p<0.05);但空腹血糖水平無統(tǒng)計學差異,隨機血糖也均<16.7mmol/L。因此,KKay小鼠在高脂誘導2周7周齡時開始出現(xiàn)高胰島素血癥。
　?、?5周齡時,KKay游泳運動組和西格列汀組與普通飲食組和高脂飲食組相比,體重、空腹及隨機血糖明顯下降,空腹胰島素水平明顯上升;與C57普通飲食組相比,體重、空腹及隨機血糖無統(tǒng)計學差異。OGTT試驗顯示與KKay普通飲食和高

6、脂飲食組相比,游泳運動和西格列汀組血糖曲線下面積明顯下降(p<0.01);IPITT試驗顯示與KKay高脂飲食組相比,游泳運動和西格列汀組血糖曲線下面積明顯下降。
　　2.⑴與KKay高脂飲食組相比,游泳運動和西格列汀組EAT、OAT和PAT各部位脂肪組織重量明顯下降(p<0.01),EAT、OAT和PAT各部位脂肪組織重量與體重比也明顯下降(p<0.05)。
　?、聘鞑课恢窘M織脂肪細胞平均最大直徑:與C57普通飲食及KK

7、ay普通飲食組相比,KKay高脂飲食組各部位脂肪細胞平均最大直徑明顯增大(p<0.01);與KKay普通飲食及高脂飲食組相比,KKay游泳運動和西格列汀組各部位脂肪細胞平均最大直徑明顯減小(p<0.01)。
　　3.KKay游泳運動和西格列汀組血清chemerin水平高于KKay高脂飲食組,而adiponectin水平低于KKay高脂飲食組,差異有統(tǒng)計學意義(p<0.05)。KKay高脂飲食組OAT和SAT chemerin mR

8、NA表達水平高于C57普通飲食組和KKay普通飲食組;KKay游泳運動組和西格列汀組OAT和SAT chemerin mRNA表達水平明顯低于KKay普通飲食組和高脂飲食組,差異有統(tǒng)計學意義(p<0.05)。在OAT,CMKLR1 mRNA顯示出與chemerin mRNA類似的變化趨勢,而在SAT,KKay高脂飲食組CMKLR1 mRNA高于C57普通飲食組,KKay各組CMKLR1 mRNA表達無明顯差異。
　　結論:

9、　　1.KKay小鼠在發(fā)展為2型糖尿病的過程中,內臟脂肪量與皮下脂肪量均有不同程度的增加。
　　2.運動生活方式和西格列汀藥物早期干預可明顯減輕總體脂量。運動干預可能減少內臟脂肪量更多,而西格列汀藥物干預可能減少皮下脂肪量更多。
　　3.血清chemerin、adiponectin水平的變化在一定程度上可反映糖代謝狀況。
　　4.在發(fā)展為糖尿病的過程中,網膜脂肪組織chemerin及其受體CMKLR1 mRNA的表達增

10、加,并且網膜脂肪組織chemerin mRNA表達水平高于皮下脂肪組織,提示內臟脂肪組織可能是血清chemerin的主要來源。
　　5.在網膜脂肪組織CMKLR1的變化趨勢與chemerin一致,而在皮下脂肪組織KKay各組小鼠CMKLR1的表達無明顯差異,考慮chemerin及其受體CMKLR1在內臟脂肪發(fā)揮的生物學作用大于皮下脂肪組織。
　　6.在糖尿病前期高胰島素血癥狀態(tài)給予運動生活方式和和DPP-4I(西格列汀)藥物