血清CD4+T淋巴細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞因子與HBeAg陽(yáng)性慢性乙型肝炎抗病毒療效相關(guān)性的研究.pdf

1、目的:慢性乙型肝炎(CHB)是一種世界性流行性疾病，其發(fā)病率高，由其導(dǎo)致的肝硬化、肝衰竭及原發(fā)性肝癌等給人類(lèi)健康造成了嚴(yán)重危害。HBV感染自然史研究表明，HBV持續(xù)復(fù)制是CHB病情進(jìn)展的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，因此抗病毒治療是CHB治療的關(guān)鍵。當(dāng)前以干擾素（包括聚乙二醇干擾素、普通干擾素等）和核苷（酸）類(lèi)似物（包括拉米夫定、阿德福韋酯、替比夫定、恩替卡韋等）為主的抗病毒治療方案能夠顯著抑制乙型肝炎病毒(HBV)復(fù)制，并在一定程度上緩解病情、延緩疾

2、病進(jìn)展及降低肝硬化、肝癌等的發(fā)生率。但是，由于受病毒、機(jī)體免疫狀態(tài)及肝臟病變程度等多種因素的影響，上述治療方案尚不能有效清除HBV，難以達(dá)到臨床治愈的目標(biāo)。機(jī)體免疫是HBV侵入人體后能否被識(shí)別、清除的關(guān)鍵，也是影響抗病毒療效和臨床預(yù)后的重要因素，效應(yīng)性CD4+T細(xì)胞所介導(dǎo)的特異性免疫應(yīng)答作為機(jī)體免疫的重要組成部分，也參與其中。既往研究顯示，HBV特異性CD4+T細(xì)胞功能缺陷是導(dǎo)致HBV感染慢性化的原因之一，CD4+T細(xì)胞亞群的調(diào)節(jié)功能失

3、衡所導(dǎo)致的免疫功能紊亂也是影響患者在抗病毒治療過(guò)程中能否實(shí)現(xiàn)良好應(yīng)答的重要因素，但這些研究集中于細(xì)胞水平的檢測(cè)，雖然能更準(zhǔn)確的反映其細(xì)胞頻數(shù)，但檢測(cè)方法較為復(fù)雜，且成本較高，不適合臨床廣泛推廣應(yīng)用。CD4+T細(xì)胞亞群的分化、功能發(fā)揮及其相互之間的作用是通過(guò)復(fù)雜的細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)實(shí)現(xiàn)的，多種細(xì)胞因子對(duì)CD4+T細(xì)胞亞群發(fā)揮免疫功能有重要影響，因此，檢測(cè)血清中CD4+T細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞因子的水平不僅能在一定程度上反映其功能狀態(tài)，操作方法也更為簡(jiǎn)便，

4、且成本較低，易于臨床應(yīng)用。本研究通過(guò)動(dòng)態(tài)觀察CHB患者在應(yīng)用不同方案進(jìn)行抗病毒治療過(guò)程中血清CD4+T淋巴細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞因子的水平變化，旨在探討血清CD4+T淋巴細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞因子水平與HBeAg陽(yáng)性CHB的抗病毒療效的相關(guān)性，以期對(duì)指導(dǎo)臨床治療及預(yù)測(cè)療效提供依據(jù)。
　　方法:研究對(duì)象為111例2012年2月至2014年1月期間的河北醫(yī)科大學(xué)第三醫(yī)院、石家莊市第五醫(yī)院及邯鄲市第六醫(yī)院門(mén)診及住院的HBeAg陽(yáng)性慢性乙型肝炎患者，其中51

5、例患者應(yīng)用聚乙二醇干擾素α-2a（派羅欣）180μg或135μg1/周(W)或聚乙二醇干擾素α-2b(佩樂(lè)能)1.5μg/kg（體重）1/W，60例患者口服恩替卡韋（潤(rùn)眾或博路定）0.5mg1/日，共觀察48周。依據(jù)48周時(shí)患者HBeAg、HBVDNA分為完全應(yīng)答(HBVDNA降至不可測(cè)、HBeAg轉(zhuǎn)陰)、部分應(yīng)答（HBVDNA較基線下降≥21gcopies/ml，HBeAg陽(yáng)性）和無(wú)應(yīng)答（HBVDNA較基線下降＜21gcopies/m

6、l，HBeAg陽(yáng)性）三個(gè)應(yīng)答組。留取基線(0W)及治療后12W、24W、48W血清標(biāo)本，并同時(shí)檢測(cè)患者肝功能、腎功能、HBV血清學(xué)標(biāo)志物和HBV DNA載量;應(yīng)用雙抗體夾心ELISA檢測(cè)血清CD4+T細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞因子水平。比較其在治療前后及不同應(yīng)答組中的水平，并動(dòng)態(tài)觀察治療過(guò)程中的變化趨勢(shì)，應(yīng)用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS13.0進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。
　　結(jié)果:
　　1患者臨床基線特征及不同治療組的應(yīng)答情況
　　在PEG-IFNα

7、治療組51例患者中有18例發(fā)生完全應(yīng)答(CR，35.29％)，CR組基線HBV DNA載量明顯低于無(wú)應(yīng)答（NR）組(P=0.036)。ETV治療組60例患者中有13例(21.67％)實(shí)現(xiàn)CR，CR組基線ALT水平明顯高于NR組（P=0.025）。
　　2血清CD4+T淋巴細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞因子在PEGIFNα治療前后的變化及與療效的相關(guān)性
　　在PEGIFNα治療過(guò)程中，不同應(yīng)答組間及治療前后血清CD4+T細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞因子IP10

8、、IL13、IL18和IL21有明顯變化及統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)，其他細(xì)胞因子未顯示與應(yīng)答相關(guān)的變化(P＞0.05)。
　　基線IP10水平在CR組明顯高于部分應(yīng)答(PR)組(P=0.048)和NR組(P＜0.001)，治療12W時(shí)各組均呈下降趨勢(shì)，但CR組下降水平明顯高于PR組和NR組，兩兩比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);
　　各應(yīng)答組治療前血清IL13水平無(wú)明顯差異（P＞0.05），治療12W時(shí)CR組和PR組較

9、基線明顯下降(P＜0.05)，NR組則無(wú)明顯變化(P=0.291)，對(duì)12W時(shí)各組IL13下降水平進(jìn)行比較顯示，CR組和PR組明顯高于NR組(P＜0.05)，PR組與CR組差異不明顯(P=0.10);
　　各應(yīng)答組血清IL18水平在治療前后各觀察時(shí)點(diǎn)均無(wú)顯著差異(P＞0.05)，但CR組和PR組24周時(shí)較基線均明顯升高(P＜0.001)，NR組則無(wú)明顯變化(P＞0.05)，比較24W時(shí)各組IL18升高水平顯示，NR組明顯低于CR組

10、(P=0.006)和PR組（P=0.048）;
　　基線各組IL21水平無(wú)明顯差異(P＞0.05)，治療12W時(shí)CR組和PR組明顯升高(P＜0.001)，CR組升高水平明顯高于PR組(P=0.004)和NR組（P=0.001）。
　　對(duì)上述相關(guān)細(xì)胞因子變化及患者年齡、性別、基線ALT水平、HBVDNA載量進(jìn)行單因素Logistic回歸分析顯示，患者基線HBVDNA載量＜6.45 lgcopies/ml(P=0.011)、AL

11、T＞179.5U/L(P=0.015)、IP10濃度＞154.245pg/ml(P=0.002)，IP10在治療12W時(shí)下降水平＞59.59pg/ml(P＜0.001)，IL13在治療12W時(shí)下降水平＞6.11pg/ml(P=0.011)，IL18在治療24W時(shí)升高水平＞26.345pg/ml(P=0.015)，IL21在治療12W時(shí)升高水平＞102.035pg/ml（P＜0.001）與完全應(yīng)答相關(guān)。多因素Logistic回歸分析顯示僅

12、IL21在治療12W時(shí)升高水平＞102.035pg/ml(P=0.045)是治療48周時(shí)完全應(yīng)答的預(yù)測(cè)因素(PPV81.25％，NPV85.71％，AUC0.823)。
　　3血清CD4+T淋巴細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞因子在ETV治療前后的變化及與療效的相關(guān)性
　　在ETV治療過(guò)程中，不同應(yīng)答組間及治療前后血清CD4+T細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞因子IP10和IL21有明顯變化及統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)，其他細(xì)胞因子未顯示與應(yīng)答相關(guān)的變化（P＞0.

13、05）。
　　治療前血清IP10水平在CR組明顯高于PR組(P=0.037)和NR組(P=0.014)，PR組和NR組差異不明顯（P=0.249）;治療12W時(shí)，CR組和PR組均較基線明顯下降(P＜0.001)，NR組無(wú)明顯變化(P=0.157)，各組治療12W時(shí)下降水平兩兩比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　各組血清IL21水平在治療前無(wú)明顯差異(P＞0.05)，CR組和PR組隨治療的時(shí)間延長(zhǎng)而呈上升趨勢(shì)，至24W

14、時(shí)明顯高于基線水平(P＜0.001)，NR組則無(wú)明顯變化（P=0.157），各組治療24W時(shí)IL21升高水平兩兩比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　對(duì)上述相關(guān)細(xì)胞因子變化及患者年齡、性別、基線ALT水平、HBVDNA載量進(jìn)行單因素Logistic回歸分析顯示，患者年齡＜38.5歲(P=0.015)，基線ALT＞163.5U/L（P=0.003）、HBVDNA載量＜6.99lgcopies/ml(P=0.081)、IP10濃

15、度＞207.69pg/ml(P=0.041),IP10在治療12W時(shí)的下降水平＞71.625pg/ml(P＜0.001)，IL21在治療24W時(shí)升高水平＞75.11pg/ml（P=0.003）與完全應(yīng)答相關(guān)。進(jìn)一步行多因素Logistic回歸分析顯示IP10在治療12W時(shí)的下降水平＞71.625pg/ml(P=0.015, PPV55.56％, NPV92.86％, AUC0.809)、IL21在治療24W時(shí)的升高水平＞75.11pg/

16、ml(P=0.035，PPV44.44％，NPV96.97％，AUC0.797)、患者年齡＜38.5歲(P=0.047)、基線HBVDNA載量＜6.99lgcopies/ml(P=0.069)是治療48周時(shí)完全應(yīng)答的預(yù)測(cè)因素。
　　4治療前血清CD4+T細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞因子與ALT、HBVDNA的相關(guān)性
　　治療前血清IP10(r=0.675，P＜0.001)和IL18（r=0.532，P＜0.001）與ALT呈正相關(guān)，IL13

17、與HBV DNA呈正相關(guān)(r=0.271，P=0.004)，其它細(xì)胞因子未顯示與二者的相關(guān)性。
　　結(jié)論:
　　1血清CD4+T細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞因子IP10、IL13、IL18和IL21與PEGIFNα治療HBeAg陽(yáng)性CHB的療效存在一定相關(guān)性，其中IL21在治療12周時(shí)的升高水平是48周時(shí)完全應(yīng)答的預(yù)測(cè)因素。
　　2血清CD4+T細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞因子IP10、IL21與ETV治療HBeAg陽(yáng)性CHB的療效有一定相關(guān)性，其中