洛伐他汀聯(lián)合外源性內(nèi)皮祖細胞修復(fù)家兔股骨頭壞死.pdf

1、研究背景:
　　按國際骨循環(huán)學會(associationresearch circulation osseons,ARCO)定義,骨壞死(osteonecrosis,ON)即是指由于各種原因(包括機械、生物等)使骨內(nèi)循環(huán)中斷,骨的活性成分死亡及隨后修復(fù)失敗的一系列復(fù)雜病理過程,其累及骨骼以及關(guān)節(jié)系統(tǒng),好發(fā)于負重關(guān)節(jié),其中以股骨頭壞死最為常見。骨壞死可以在任何年齡、性別發(fā)病,但患者絕大多數(shù)為30～59年齡組,其男女發(fā)病率比約為8:1

2、。研究表明:此類病人在美國此類病人約有30-60萬,并且每年新增加病人1-2萬,明確診斷的患者中,10％需要行全髖置換術(shù)占10%。在我國,隨著皮質(zhì)類固醇的廣泛應(yīng)用,酗酒嚴重增加,其引起非創(chuàng)傷性骨壞死發(fā)生也隨之增加?；颊叱霈F(xiàn)骨壞死的一系列癥狀。最終導致患者勞動能力散失,具有相當高的致殘率。目前對于早期股骨頭壞死一般行對癥治療,而晚期則行髖關(guān)節(jié)置換術(shù)。醫(yī)學界一直在尋求更為有效治療手段。
　　對于骨壞死的發(fā)病機制,現(xiàn)在普遍認為,微血栓的

3、形成是非創(chuàng)傷性骨壞死骨細胞死亡和骨結(jié)構(gòu)喪失的主要原因。血管內(nèi)、外的高壓加之脂肪細胞的增生在微血管阻塞中起到一定作用。非創(chuàng)傷性骨壞死的病因有以下的幾個假說,如血管內(nèi)凝血學說、骨內(nèi)高壓、脂肪栓塞學說、骨質(zhì)疏松學說、靜脈淤滯學說、及微血管損傷學說等,原因最終都可以歸為機械性原因。血栓栓塞和血管外壓迫阻斷了血管內(nèi)的血流,導致骨組織的缺血,最后出現(xiàn)骨細胞的壞死。微循環(huán)的血栓形成及血管內(nèi)凝血是引起非創(chuàng)傷性骨壞死的各種病因的共同通路,在很多骨壞死患者

4、的病理標本中發(fā)現(xiàn)的微循環(huán)血栓證實了這個觀點。
　　股骨頭壞死(Osteonecrosis of the femoral head,ONFH)是指股骨骨小梁、骨髓細胞的壞死,最終導致髖關(guān)節(jié)功能障礙。皮質(zhì)醇的廣泛應(yīng)用是股骨頭壞死的重要原因之一,然而由于并不清楚其病生理的過程,防治十分困難。皮質(zhì)醇可能通過引起高脂血癥,因此繼而引起股骨頭微血管的脂肪栓塞,最終導致股骨頭壞死。皮質(zhì)醇引起的股骨頭壞死是部分患者接受激素治療的重要并發(fā)癥之一。由

5、于機械的發(fā)病原因在年輕患者,激素性股骨頭壞死一般均位于承重區(qū)域,因此一旦股骨頭塌陷、髖關(guān)節(jié)將產(chǎn)生毀損性損傷,關(guān)節(jié)功能喪失,后果嚴重。
　　內(nèi)皮祖細胞(endothelial progenitor cells,EPCs)又稱為血管前體細胞,自1997年 Asahara首次詳細地描述了 EPCs可以向內(nèi)皮細胞分化并參與血管的更新重塑作用以來,便成為血管更新研究的熱點。周圍血管疾病如肢體缺血、嚴重的腦和心肌缺血,在缺血組織中植入內(nèi)皮祖細

6、胞可以證明其可以促使血管生成。最近研究發(fā)現(xiàn),在骨折、骨缺損患者中,局部植入血管內(nèi)皮祖細胞可以促進血管再生,和加速骨再生速度。然而,內(nèi)皮祖細胞是否可以促進股骨頭血管再生,修復(fù)股骨頭骨壞死,對臨床治療股骨頭壞死有重要意義。
　　生理狀態(tài)下,EPCs主要存在于人體骨髓組織中,外周血中EPCs的數(shù)量僅占血液循環(huán)中單個核細胞的0.01%。EPCs的動員就是刺激骨髓組織中的EPCs向外周血遷移。EPCs的早期動員在骨髓組織的微環(huán)境中進行。是由

7、纖維母細胞、骨原細胞及內(nèi)皮細胞等組成的微環(huán)境——“干細胞龕”。其決定著祖細胞的動員。在動員因素方面,內(nèi)源性組織缺血、缺血、燒傷、局部的血管損傷、創(chuàng)傷等均可刺激EPCs從骨髓中動員出來。體內(nèi)的干細胞、內(nèi)皮祖細胞的動員、轉(zhuǎn)移到受損部位,并且修復(fù)缺損組織,是體內(nèi)組織修復(fù)的重要方式之一。但外源性的干細胞、內(nèi)皮祖細胞在臨床應(yīng)用中受到了倫理、細胞活性、細胞污染及細胞存活率等多個方面不可控因素的限制,于是如何動員自體細胞向需要修復(fù)的部位遷移就成為目前

8、研究機體損傷修復(fù)的熱點。有文獻報道,局部植入他汀類藥物是可以促使干細胞向骨折部位遷移,修復(fù)骨缺損因此,我們的工作可以試圖從建立的家兔股骨頭壞死模型中使用外源性內(nèi)皮祖細胞,及洛伐他汀的干預(yù)鑒定其修復(fù)的效果。
　　本課題的主要研究內(nèi)容:(1)建立家兔股骨頭壞死模型;(2)外源性內(nèi)皮祖細胞及洛伐他汀干預(yù)(3)修復(fù)結(jié)果的鑒定。
　　目的:
　　探討洛伐他汀聯(lián)合外源性內(nèi)皮祖細胞修復(fù)家兔股骨頭壞死的可能性。
　　方法:

9、>　　(1)建立激素誘導的家兔股骨頭壞死模型4組,實驗組3組,對照組1組,每組各9只;
　　(2)分離培養(yǎng)內(nèi)皮祖細胞;
　　(3)3組實驗組分別給予耳緣靜脈注射內(nèi)皮祖細胞、灌服洛伐他汀、耳緣靜脈注射內(nèi)皮祖細胞合并灌服洛伐他汀,對照組不做處理。于注射后4、8周觀察各組家兔的一般情況并行X線、組織病理學觀察骨質(zhì)修復(fù)的效果。
　　結(jié)果:
　　單純注射外源內(nèi)皮祖細胞組、單純灌服洛伐他汀組骨壞死組織均出現(xiàn)修復(fù),但其修復(fù)效果