人參皂甙對培養(yǎng)軟骨細胞代謝作用實驗研究.pdf

1、本文研究目的：骨性關(guān)節(jié)炎和軟骨缺損后自身修復能力有限，常因無力承擔各種應力而退變，臨床療效不佳。目前，關(guān)于促進關(guān)節(jié)軟骨缺損的修復、提高修復質(zhì)量方面的研究頗多，但沒有一種方法能高質(zhì)量的修復關(guān)節(jié)軟骨缺損，并達到很好的遠期療效。尋求一種新的方法和手段提高本病療效已成為必需。 研究材料與方法： 1.建立軟骨細胞體外培養(yǎng)體系，甲苯胺藍染色進行軟骨細胞鑒定采用兩步法進行軟骨細胞分離、培養(yǎng)和傳代。并用甲苯胺藍染色行細胞鑒定。

2、2.人參皂甙Rg1、Rb1對軟骨細胞增殖和蛋白合成的影響設(shè)人參皂甙Rg1、Rb1高、中、低劑量組，對照組和空白組。運用MTT法和Bradford蛋白檢測法檢測人參皂甙對軟骨細胞合成代謝的促進作用。 3.人參皂甙Rg1、Rb1對IL-1誘導軟骨細胞凋亡的抑制作用建立軟骨細胞凋亡模型，流式細胞術(shù)、Hoechst檢測和透射電鏡對軟骨細胞凋亡進行定量、定性、形態(tài)和細胞超微結(jié)構(gòu)觀察。 研究結(jié)果： 1.建立軟骨細胞體外培養(yǎng)體

3、系和細胞鑒定消化時間為(6.17±1.63)h，細胞獲得率(1.43±0.24)×105/100mg，存活率(84.17±5.08)％，24h貼壁率(59.17±7.36)％。 2.人參皂甙Rg1、Rb1對軟骨細胞增殖及蛋白合成的促進作用人參皂甙Rg1、Rb1明顯促進細胞增殖和蛋白合成，細胞飽滿，折光度好，分泌大量基質(zhì)，形成軟骨樣組織。Bradford蛋白定量檢測人參皂甙組蛋白合成量明顯高于對照組；Rg1促進蛋白合成能力明顯高于

4、Rb1。 3.人參皂甙Rg1、Rb1對IL-1誘導的軟骨細胞凋亡的抑制作用人參皂甙Rg1、Rb1能明顯抑制IL-1介導的軟骨細胞凋亡，兩組之間無明顯差異性。人參皂甙的這種保護作用在細胞形態(tài)學和超微結(jié)構(gòu)上得到直接證明。 研究結(jié)論：合適濃度的人參皂甙Rg1、Rb1能明顯促進體外培養(yǎng)軟骨細胞的增殖和蛋白的合成；人參皂甙Rg1m、Rb1m抑制白介素-1介導引起的細胞凋亡，有效地保護軟骨細胞，達到防止軟骨退變的目的，但兩者之間無明