丙戊酸鈉對C6膠質(zhì)瘤大鼠正常腦組織的放射保護(hù)作用.pdf

1、目的:腦膠質(zhì)瘤，亦稱神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤，是神經(jīng)系統(tǒng)最常見的原發(fā)性腫瘤，因具有頑固性、易局部播散和復(fù)發(fā)等特點(diǎn)，預(yù)后極差。目前，放射治療已成為腦膠質(zhì)瘤術(shù)后的主要輔助治療方式之一。然而，放射治療在治愈或控制腫瘤時(shí)的劑量與引起正常組織損傷劑量之間的梯度較小。為了提高腫瘤放療療效，一方面可通過三維適形放療減少正常組織的受量，同時(shí)加大腫瘤放療劑量;另一方面也可通過改善腫瘤的放射敏感性，來增強(qiáng)放射線的殺傷力。放射治療中在控制腫瘤的同時(shí)最大限度地減少對正常

2、組織的損傷，是我們目前所面臨的一個(gè)重大挑戰(zhàn)。組蛋白去乙酰化酶抑制劑(histone deacetylase inhibitors，HDACIs)作為新一代的抗腫瘤藥物，近來有研究發(fā)現(xiàn)，HDACIs作為放射保護(hù)劑可以減輕正常組織的輻射損害。丙戊酸鈉(valproic acid,VPA)由于其作用緩和、低毒性，被廣泛應(yīng)用于腦腫瘤患者的抗癲癇治療。目前體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)VPA作為HDACIs可以增強(qiáng)腦腫瘤的放射敏感性，但是其作為放射保護(hù)劑的研究較

3、少。本研究選取VPA作為研究對象，通過觀察VPA對C6膠質(zhì)瘤大鼠正常腦組織的放射保護(hù)作用，為VPA作為放射保護(hù)劑在膠質(zhì)瘤放療中的應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法:體外常規(guī)培養(yǎng)C6細(xì)胞，種植于Wistar大鼠右側(cè)尾狀核，一周后MRI確認(rèn)C6大鼠膠質(zhì)瘤模型是否建立成功。48只荷瘤大鼠隨機(jī)分為4組(n=12)，即對照組、VPA組、放療組及聯(lián)合組。對照組給予假照射和注射生理鹽水;VPA組給予假照射和注射VPA(150mg/kg)，5天;放療組

4、給予單次劑量為3GyX線照射5天和注射生理鹽水;聯(lián)合組給予單次劑量為3GyX線照射5天和注射VPA(150mg/kg)，5天。放療結(jié)束后24h，四組各取6只大鼠給予4％多聚甲醛心臟灌注處死，免疫組化檢測荷瘤大鼠腫瘤對側(cè)正常腦組織Caspase-3的表達(dá)水平來觀察細(xì)胞凋亡情況;記錄剩余4組(n=6)大鼠的生存期。24只正常大鼠同上隨機(jī)分為四組，接受對應(yīng)的相同處理。記錄正常大鼠自VPA注射之日開始2周內(nèi)每日體重變化。放療結(jié)束后6個(gè)月，大鼠4

5、％多聚甲醛心臟灌注處死，電鏡觀察正常腦組織血管壁、神經(jīng)元細(xì)胞核、突觸結(jié)構(gòu)及數(shù)目改變。
　　結(jié)果:MRI顯示C6大鼠膠質(zhì)瘤模型建立成功。免疫組化結(jié)果示放療組相較于聯(lián)合組腫瘤對側(cè)腦組織在細(xì)胞核上可見明顯的Caspase-3表達(dá)，Caspase-3的表達(dá)定位于細(xì)胞核內(nèi)，為棕黃色染色。VPA組、放療組及聯(lián)合組大鼠生存期較對照組(17d)延長，其中位生存期分別為19d、23d、28d。聯(lián)合組與放療組大鼠生存期存在明顯差別(p＜0.05)，同

6、時(shí)聯(lián)合組存在長期幸存大鼠(＞50d)。自放療開始后，放療組與聯(lián)合組大鼠體重存在明顯差別(p＜0.05)，且與其余3組相比較放療組體重存在明顯下降趨勢。放療期間聯(lián)合組相較于放療組存在一個(gè)相對穩(wěn)定的體重緩慢增長趨勢。放療結(jié)束后，聯(lián)合組及放療組均存在體重上升趨勢。電鏡結(jié)果示放療組血管壁出現(xiàn)嚴(yán)重的結(jié)構(gòu)紊亂及不規(guī)則增厚，以及玻璃樣變性和纖維變性等改變。聯(lián)合組可見白質(zhì)中部分毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞局部腫大，同時(shí)在不規(guī)則的管腔見毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞輕度腫大。然而

7、在對照組及VPA組中可見正常血管壁。放療組神經(jīng)元核膜表面凹凸不平及不規(guī)整，甚至有損傷。然而聯(lián)合組神經(jīng)元核膜表面輕度不規(guī)整，沒有損傷。對照組及VPA組示神經(jīng)元核膜正常。電鏡觀察聯(lián)合組突觸結(jié)構(gòu)尚清晰、數(shù)量多，放療組突觸結(jié)構(gòu)不完整、數(shù)量減少。
　　結(jié)論:VPA對C6膠質(zhì)瘤大鼠的正常腦組織存在放射保護(hù)作用，其中抑制放射所致的正常細(xì)胞凋亡發(fā)揮了重要作用。VPA聯(lián)合放療可顯著延長C6膠質(zhì)瘤大鼠的生存期，考慮與VPA發(fā)揮了保護(hù)正常腦組織作用有關(guān)