水飛薊賓誘導(dǎo)唾液腺腺樣囊性癌ACC-M細(xì)胞自噬的研究.pdf

1、本文對(duì)水飛薊賓誘導(dǎo)唾液腺腺樣囊性癌ACC--M細(xì)胞自噬進(jìn)行了研究。本研究分為兩個(gè)部分：
　　第一部分：自噬相關(guān)蛋白在腺樣囊性癌組織中的表達(dá)及其意義。
　　目的：研究微管相關(guān)蛋白1輕鏈3(microtubule associated protein1 light chain3，LC3)在唾液腺腺樣囊性癌組織中的表達(dá)并探討其在腺樣囊性癌發(fā)生發(fā)展中的作用。
　　方法：免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)45例腺樣囊性癌組織及23例正常唾液腺

2、組織標(biāo)本中LC3的表達(dá)。
　　結(jié)果：腺樣囊性癌組織和正常腺體組織中LC3表達(dá)陽(yáng)性率分別為42.22％和91.30％，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　結(jié)論：LC3在腺樣囊性癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)低于正常腺體組織，自噬可能與腺樣囊性癌的發(fā)生發(fā)展有關(guān)。
　　第二部分：水飛薊賓誘導(dǎo)唾液腺腺樣囊性癌ACC-M細(xì)胞自噬的實(shí)驗(yàn)研究。
　　目的：探討水飛薊賓(silibinin，SB)對(duì)人唾液腺腺樣囊性癌ACC-M細(xì)胞增殖

3、及自噬的影響。
　　方法：MTT法檢測(cè)水飛薊賓對(duì)ACC-M細(xì)胞體外生長(zhǎng)的抑制作用;倒置相差顯微鏡觀察水飛薊賓對(duì)ACC-M細(xì)胞形態(tài)學(xué)的影口向;丹磺酰戊二胺(monodansyl cadaverine，MDC)染色及透射電子顯微鏡觀察自噬體形成;Western blot檢測(cè)自噬相關(guān)蛋白微管相關(guān)蛋白1輕鏈-3(microtubule associated protein1 light chain3，LC3)表達(dá)的變化，數(shù)據(jù)以(x)±s表

4、示，采用SPSS13.0軟件包進(jìn)行單因素方差分析，P＜0.05為差異具有顯著性。
　　結(jié)果：水飛薊賓呈劑量和時(shí)間依賴的方式抑制ACC-M細(xì)胞生長(zhǎng)，并誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生自噬;MDC染色可見自噬體增多，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)呈密集的點(diǎn)狀亮綠色熒光，電鏡下實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞內(nèi)可見到雙層膜結(jié)構(gòu);Western blot顯示水飛薊賓上調(diào)ACC-M細(xì)胞LC3-Ⅰ和LC3-Ⅱ蛋白的表達(dá)，LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值隨著水飛薊賓干預(yù)劑量的增大和時(shí)間的延長(zhǎng)而增加。
　　結(jié)