2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、核衣殼蛋白(N蛋白)是SARS冠狀病毒(SARS-CoV)的主要結(jié)構(gòu)蛋白之一,與病毒RNA結(jié)合形成核衣殼,能夠誘導(dǎo)強烈的細胞免疫和體液免疫,在SARS的診斷和預(yù)防上具有重要的應(yīng)用。與其它冠狀病毒N蛋白不同,SARS-CoV N蛋白定位于細胞質(zhì),參與SARS冠狀病毒RNA合成的調(diào)控以及核衣殼的形成。并且,SARS-CoV N蛋白能結(jié)合人親環(huán)素(hCypA)解離病毒核心,激活A(yù)P-1信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑,從而干擾宿主細胞分裂,在生長因子缺乏的情況下

2、誘導(dǎo)細胞凋亡。前期工作發(fā)現(xiàn)N蛋白可能在SARS冠狀病毒感染過程中起重要作用。為了研究SARS-CoV N蛋白參與炎癥反應(yīng)的分子機理,以全長N蛋白為誘餌蛋白,利用酵母雙雜交篩選人胎肝cDNA文庫時,發(fā)現(xiàn)細胞色素P450(CYP4F3A)與SARS-CoV N蛋白相互作用。CYP4F3A是炎癥反應(yīng)過程中重要的調(diào)節(jié)蛋白,其相互作用很可能與SARS病毒的致病性相關(guān)。
  本研究建立了CYP4F3A在體外的酶促反應(yīng)體系及其動力學(xué)常數(shù)測定方法

3、,并通過一系列離子交換層析、分子篩凝膠過濾層析、免疫沉淀、免疫印跡以及ELISA證明,SARS-CoV N蛋白與CYP4F3A結(jié)合可以抑制CYP4F3A的ω-羥化酶活性,從而抑制炎癥因子LTB4的降解。N蛋白在體外抑制CYP4F3A的酶活,使其Km’值從2.5μmol/L變?yōu)?0.2μmol/L,而加入229E N蛋白后Km’僅變化為4.82μmol/L。我們發(fā)現(xiàn)通過尾靜脈注射N蛋白在LPS誘導(dǎo)小鼠炎癥模型中起促進炎癥反應(yīng)的作用。Sil

4、ybin是從植物水飛薊中提取的黃酮類化合物,具有抑制5-酯氧酶的作用,從而間接阻斷了LTB4的合成。當在LPS注射前1h給予藥物Silybin,LTB4濃度比未給藥組低。說明Silybin可以通過阻斷炎癥介質(zhì)的生成來保護LPS誘導(dǎo)產(chǎn)生的急性肺損傷。并且,當肌肉注射表達N蛋白的質(zhì)粒并腹腔注射LPS的小鼠血清中LTB4水平與對照組相比升高。將質(zhì)粒與MDP-C(胞壁肽佐劑)一起通過靜脈免疫家兔,動物產(chǎn)生顯著的過敏樣反應(yīng)。小鼠和家兔肺部及腸道中

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