肝臟藥物代謝酶CYP450的影響.pdf

1、目的：探討columbin對實驗性2型糖尿病大鼠肝臟藥物代謝酶細胞色素P450（CYP450）活性的影響，深入研究其對實驗性2型糖尿病大鼠肝臟CYP450各亞酶基因表達及對CYP2E1蛋白表達的調(diào)節(jié)作用。
　　 方法：高脂高糖飲食聯(lián)合小劑量腹腔注射鏈脲佐菌素（STZ）30mg/kg，建立實驗性2型糖尿病大鼠模型。實驗動物共分4組：正常對照組、模型對照組（蒸餾水5mg/kg/d），低、高劑量columbin組（25、50mg/kg

2、/d），連續(xù)灌胃給藥4 W，末次給藥2 h后斷頭處死，制備肝微粒體，提取肝臟細胞mRNA。采用酶化學法檢測肝微粒體CYP450總酶含量、各亞酶催化活性；實時定量逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈式反應（Quantitive real-time RT-PCR）法測定肝臟CYP450各亞酶mRNA的相對表達水平；蛋白免疫印跡法Western blotting檢測肝臟CYP2E1酶蛋白相對表達量。
　　 結(jié)果：①2型糖尿病狀態(tài)下肝臟CYP450總酶含量

3、與正常組相比，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05），高劑量可顯著降低2型糖尿病肝臟CYP450總酶含量，約為模型組的0.68（P＜0.01）②2型糖尿病模型大鼠肝臟CYP1A1、CYP1A2、CYP2B1活性增強，在CYP1A1、CYP1A2和CYP2B1 mRNA轉(zhuǎn)錄水平有不同程度的上調(diào)；低、高劑量columbin均可逆轉(zhuǎn)糖尿病狀態(tài)下上述CYP450亞型的活性及mRNA表達的變化，并隨劑量增高其逆轉(zhuǎn)作用有增強的趨勢：與模型組相比，colu

4、mbin可降低CYP1A1、CYP1A2、CYP2B1活性，不同程度下調(diào)三者的mRNA轉(zhuǎn)錄水平。③2型糖尿病狀態(tài)下CYP2D1活性及其mRNA的表達有輕微的降低，但與正常組相比其差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05），給予columbin對CYP2D1活性及mRNA表達亦無明顯影響。④2型糖尿病狀態(tài)下CYP2C11、CYP2E1和CYP3A1的活性降低，三者的mRNA轉(zhuǎn)錄水平均有不同程度的下降，CYP2E1的蛋白表達量顯著降低；低、高劑量co

5、lumbin均可逆轉(zhuǎn)上述CYP450酶亞型的活性及mRNA表達的變化，并隨劑量增高其逆轉(zhuǎn)作用有增強的趨勢：與模型組相比較，columbin可增強CYP2C11、CYP2E1和CYP3A1活性，不同程度的上調(diào)CYP2C11、CYP2E1和CYP3A1的mRNA轉(zhuǎn)錄及CYP2E1的蛋白表達。
　　 結(jié)論：在2型糖尿病狀態(tài)下，大鼠肝臟藥物代謝酶CYP450會發(fā)生變化，columbin可相應的逆轉(zhuǎn)這些變化，使肝臟藥物代謝酶趨向正常，為2