冬凌草甲素對(duì)CYP450酶的影響及其機(jī)制研究.pdf

1、一直以來，中草藥作為日常生活的營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑或臨床實(shí)踐中的治療藥物被廣泛使用。然而，中草藥與其他治療藥物聯(lián)合使用時(shí)，其安全性在很大程度上是未知的。許多研究表明，中草藥可以增加其聯(lián)合使用的治療藥物所導(dǎo)致不良事件發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)。產(chǎn)生這一現(xiàn)象的主要原因是由于誘導(dǎo)或抑制藥物代謝酶，從而導(dǎo)致被其代謝的治療藥物藥代動(dòng)力學(xué)特征發(fā)生改變。
　　細(xì)胞色素P450酶(Cytochrome P450，CYP450)是體內(nèi)重要的Ⅰ相代謝酶之一，主要分布于肝臟，腸

2、道及腎臟等組織器官。其功能主要是將外源性或內(nèi)源性物質(zhì)轉(zhuǎn)化為極性衍生物，使這些物質(zhì)可與Ⅱ相代謝酶或藥物轉(zhuǎn)運(yùn)體結(jié)合進(jìn)行下一步代謝，從而更易于排出體外。因此，CYP450酶的數(shù)量和活性直接影響藥物在體內(nèi)的代謝活化與外排。
　　冬凌草甲素為唇形科香茶菜屬（Lamiaceae Rabdosia）植物冬凌草中分離出的貝殼杉烯二萜類物質(zhì)，具有抗氧化，保肝及抗腫瘤等藥理作用。其廣泛的生物學(xué)活性和潛在的抗腫瘤作用，使冬凌草甲素成為常用的輔助治療性植

3、物提取物，與其它藥物合用的機(jī)率越來越多。但關(guān)于冬凌草甲素對(duì)CYP450酶及其它代謝相關(guān)基因的影響暫無報(bào)道，因此當(dāng)冬凌草甲素與其它治療藥物聯(lián)合使用時(shí)是否存在潛在的藥物-藥物相互作用尚不清楚。
　　本課題以研究冬凌草甲素對(duì)CYP450酶及其它代謝相關(guān)基因的影響為主要目的，進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn):
　　(1)建立了表達(dá)核受體hPXR及CYP3A4啟動(dòng)子的熒光報(bào)告基因平臺(tái)，對(duì)22種常用的中藥單體化合物進(jìn)行篩選，發(fā)現(xiàn)冬凌草甲素，川芎嗪，石杉?jí)A

4、甲具有較強(qiáng)的hPXR激活作用。
　　(2)在人源化hPXR小鼠體內(nèi)進(jìn)行體內(nèi)試驗(yàn)，觀察冬凌草甲素對(duì)hPXR下游調(diào)控基因的表達(dá)及功能活性的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明冬凌草甲素對(duì)Cyp3a11、Cyp2a4及Cyp2c家族的表達(dá)及活性均勻誘導(dǎo)作用。同時(shí)，電子供體POR的mRNA表達(dá)也有顯著升高。
　　(3)在LS174T細(xì)胞中對(duì)各主要的CYP450酶進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)冬凌草甲素可使CYP1A2、CYP2A6、CYP2C9、CYP2D6、CYP

5、2E1、CYP3A4和POR的mRNA表達(dá)水平顯著升高，并可在細(xì)胞水平誘導(dǎo)CYP2A6、CYP2C9和CYP3A4的活性。
　　(4)在C57BL/6小鼠體內(nèi)對(duì)各主要的CYP450酶進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)冬凌草甲素可使Cyp1a1、Cyp1a2、Cyp2a4、Cyp2c37、Cyp2c39、Cyp2c40、Cyp2d9、Cyp2d22、Cyp2e1、Cyp3a11以及核受體CAR，PXR與電子供體POR的mRNA表達(dá)增加。同時(shí)，使Cyp1