胰腺癌模型靶向淋巴管熒光成像及VEGF-C shRNA對腫瘤抑制作用的實驗研究.pdf

1、徐州醫(yī)學院碩士學位論文胰腺癌模型靶向淋巴管熒光成像及VEGF--C shRNA對腫瘤抑制作用的實驗研究姓名：史玉振申請學位級別：碩士專業(yè)：影像醫(yī)學與核醫(yī)學指導教師：王中秋2012-06徐州醫(yī)學院碩士學位論文管一皮下瘤引流實驗，將B x P C ．3 一G F P 細胞接種于裸鼠雙側下腹部，待皮下瘤生長至O ．5 c m ×0 ．5 e r a 時，于裸鼠左側腹股溝淋巴結內(nèi)注射2 0 I ．t l 探針，分別于注射后2 0 m

2、i n 、l h 、1 2 h 、2 4 h 行D s R e d 熒光成像。結果胰腺癌裸鼠原位移植成瘤率為1 0 0 ％。1 0 只荷瘤裸鼠中有7 只于原位移植后1 9 天，可在I F L U O R ．1 0 0 熒光成像系統(tǒng)下觀察到原位腫瘤的綠色熒光，腫瘤平均體積0 ．5 4 c m 3 ，2 3 天后全部可以在熒光成像系統(tǒng)下較清楚的看到腫瘤的大小，腫瘤平均體積2 ．5 0 c m 3 ，至2 8 天時可見腫瘤顯示明顯綠色熒光，部

3、分腫瘤周圍腹部見顯示綠色熒光的結節(jié)灶，腫瘤平均體積3 ．4 6 c m 3 。開腹熒光成像，整個腫瘤發(fā)出強烈綠色熒光，腫瘤與周圍組織關系清晰可見，7 只裸鼠腫瘤周圍腹部出現(xiàn)顯示綠色熒光的大小不一的淋巴結，肝、肺、。腎、脾均未見明顯熒光灶。探針靶向淋巴管成像，各時間點腫瘤均未見明顯紅色熒光出現(xiàn)。I F L U O R - 1 0 0 熒光成像系統(tǒng)下所見原發(fā)與轉移灶均經(jīng)病理證實，淋巴結轉移率為7 0 ％。采用I V I S L u m i

4、n a X R 熒光成像系統(tǒng)，初次預實驗，探針靶向淋巴管D s R e d 熒光成像，對照鼠出現(xiàn)D s R e d假陽性信號，其他探針鼠只見鼠尾注藥后殘留的探針信號，腫瘤始終未見探針信號；對腫瘤標本行D s R e d 熒光成像，探針鼠腫瘤內(nèi)檢測到探針信號，對照鼠腫瘤內(nèi)無信號。免疫組化證實D 2 —4 0 探針進入腫瘤內(nèi)并與淋巴管結合。淋巴結一淋巴管-皮下瘤引流實驗中，D s R e d 熒光成像，注射點處探針信號明顯，而各時間點均未探

5、測到腫瘤內(nèi)的探針信號。實驗過程中，腫瘤G F P 熒光成像均可較好地顯示腫瘤的G F P 信號。結論活體熒光成像可以在體外無創(chuàng)、動態(tài)觀察G F P 標記的胰腺癌裸鼠原位移植瘤模型的發(fā)生、發(fā)展，但對解剖細節(jié)及深部轉移顯示欠佳；開腹熒光成像解剖清晰，顯示轉移、侵犯等細節(jié)清楚，但不能動態(tài)觀察；D 2 —4 0 熒光分子探針能進入腫瘤并結合淋巴管，但信號弱，活體不能顯像，靶向胰腺癌淋巴管活體熒光成像有待于進一步研究。關鍵詞胰腺腫瘤：熒光成像；D