腺苷2A受體激活對(duì)大鼠小體積肝移植多種損傷機(jī)制的影響及其機(jī)制研究.pdf

1、本文主要從以下幾個(gè)部分展開(kāi)：
　　 第一章大鼠小體積肝移植模型的建立
　　 目的：建立穩(wěn)定實(shí)用的大鼠小體積肝移植模型。
　　 方法：選用雄性SD大鼠做供、受體，個(gè)體質(zhì)量180-220克。大鼠肝臟右中葉和右上、下側(cè)葉為移植物，占受體大鼠肝重的35％～45％。門(mén)靜脈、肝下下腔靜脈采用改良的二袖套法吻合。
　　 結(jié)果：共進(jìn)行了41次預(yù)實(shí)驗(yàn)。可大致分為兩個(gè)階段，第1-24次為第一階段，其中前9次實(shí)驗(yàn)只1次成功。手

2、術(shù)水平提高后，我們做了第二階段預(yù)實(shí)驗(yàn)（第25-41次），實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：17例手術(shù)中有15例手術(shù)成功，其中有11例存活超過(guò)三天，造模成功率成功率是88.4％，三天存活率64.7％。供體大鼠取肝平均手術(shù)時(shí)間(44.1+-5.3)min;修肝平均手術(shù)時(shí)間為(14.6+-7.5)min;大鼠部分肝移植平均手術(shù)時(shí)間為(58.2+-10.6)min受體大鼠無(wú)肝期為（25.2+-3.1）min;移植物冷缺血時(shí)間約（58.24+-7.5）min。

3、>　　 結(jié)論：采用本方法建立的大鼠小體積肝移植模型穩(wěn)定、成功率高。
　　 第二章腺苷2A受體激活對(duì)大鼠小體積肝移植中氧化損傷的影響及機(jī)制研究
　　 目的：在大鼠小體積肝移植模型上研究腺苷2A受體激動(dòng)對(duì)氧化損傷的影響。
　　 方法：在大鼠小體積肝移植模型上，將受體大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、激動(dòng)組、激動(dòng)+拮抗組。并于再灌注6小時(shí)后，分別檢測(cè)肝臟損傷指標(biāo)：血漿AST;毒性過(guò)氧化物指標(biāo)：MDA;酶性抗氧化物(SOD、CAT、

4、GSH-Px)活性及非酶性抗氧化物(AA、GSH、TOC)含量。
　　 結(jié)果：與對(duì)照組比較，激動(dòng)組SOD和GSH-PX活性明顯增加，而CAT活性無(wú)明顯變化，AST的釋放顯著下降，AA、GSH、TOC表達(dá)水平顯著提高。而與對(duì)照組比較，激動(dòng)+拮抗組SOD和GSH-PX活性無(wú)明顯增加，且有所下降，而CAT活性無(wú)明顯變化，AST的釋放稍有上升，AA、GSH、TOC表達(dá)水平基本相同。
　　 結(jié)論：A2AR激活上調(diào)了非酶性抗氧化物的

5、表達(dá)，增加了酶性抗氧化物的活性，增加了大鼠肝臟的抗氧化能力，抑制了脂質(zhì)氧化損傷，從而減少在小體積肝移植中的移植肝的過(guò)氧化損傷。
　　 第三章激活腺苷2A受體抑制大鼠T細(xì)胞體外活化、增殖和細(xì)胞毒作用
　　 目的：研究激活腺苷受體對(duì)大鼠T細(xì)胞體外活化、增殖及細(xì)胞毒效應(yīng)的影響。
　　 方法：植物血凝素(phytohemagglutinin，PHA)刺激大鼠脾臟來(lái)源的淋巴細(xì)胞，以不同終濃度的CGS21680與T細(xì)胞共培養(yǎng)

6、；熒光抗體染色結(jié)合流式細(xì)胞術(shù)，檢測(cè)T細(xì)胞活化抗原CD69、CD25的表達(dá)及細(xì)胞增殖；ELISA法分別檢測(cè)IL-2、INF-γ含量。綜合評(píng)價(jià)影響腺苷2A受體對(duì)T細(xì)胞活化、增殖、毒作用的變化。
　　 結(jié)果：濃度分別為0.01μM/L、0.1μM/L、1μM/L、1OμM/L的CGS21680均明顯抑制了PHA刺激的T細(xì)胞表面CD25、CD69分子的表達(dá)；抑制了T細(xì)胞增殖，由陽(yáng)性對(duì)照組(80.00+-7.12)％分別降為（69.17+

7、-3.49）％、(67.33+-5.35)％、(55.17+-3.71)％和（41.67+-7.23）％；也對(duì)IL-2、INF-γ的分泌產(chǎn)生明顯抑制（與陽(yáng)性對(duì)照組相比，各組P值<0.01）。
　　 結(jié)論：激活腺苷2A受體能有效地抑制大鼠T細(xì)胞的體外活化、增殖及細(xì)胞毒作用。
　　 第四章腺苷2AR在大鼠肝臟缺血再灌注損傷中的表達(dá)及意義
　　 目的：通過(guò)觀察腺苷2AR、炎癥因子在大鼠肝臟缺血再灌注損傷中的時(shí)間變化趨勢(shì)

8、，探討A2AR與炎癥因子在大鼠肝臟缺血再灌注中的可能作用機(jī)制及相互關(guān)系。
　　 方法：分別檢測(cè)缺血前、缺血20分鐘后再灌注0、1、3、6、12、18、24小時(shí)后肝臟A2AR蛋白表達(dá)，炎性因子TNF-α、MIP-2、ICAM-1含量變化，以及組織MPO活性的變化。分析它們的時(shí)間趨勢(shì)及相互之間的可能關(guān)系。
　　 結(jié)果：A2AR表達(dá)于再灌注后12小時(shí)達(dá)高峰，隨后逐漸下降再灌注24小時(shí)復(fù)降至正常以下水平。而TNF-α,MIP-2