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1、系統(tǒng)性硬皮病患者成纖維細(xì)胞合成膠原增多,引起皮膚硬化和內(nèi)臟器官纖維化.已有文獻(xiàn)顯示,低氧狀態(tài)下,正常人成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)加快,合成膠原增多.但缺氧能否引起系統(tǒng)性硬皮病患者皮膚成纖維細(xì)胞合成膠原蛋白增加,膠原基因表達(dá)增強(qiáng),進(jìn)而加重患者皮膚硬化和內(nèi)臟器官纖維化尚未見(jiàn)文獻(xiàn)報(bào)道.目的:研究低氧對(duì)系統(tǒng)性硬皮病患者和正常皮膚成纖維細(xì)胞膠原蛋白合成及膠原基因表達(dá)的影響.方法:1.以組織塊培養(yǎng)法建立5個(gè)系統(tǒng)性硬皮病患者和5個(gè)正常皮膚成纖維細(xì)胞系;2.將成纖
2、維細(xì)胞分別放入20%正常氧分壓和2%的低氧分壓環(huán)境中培養(yǎng),分別于放入的第3天和第6天.用分光光度儀測(cè)定細(xì)胞培養(yǎng)基上清液中羥脯氨酸含量并折算成膠原蛋白含量;3.將SSc患者和正常皮膚成纖維細(xì)胞分別在20%正常氧分壓和2%低氧分壓環(huán)境中培養(yǎng)3天,用TRIzol提取細(xì)胞總RNA,用RT-PCR方法測(cè)定其中Ⅰ型和Ⅲ型膠原基因的表達(dá).結(jié)論:低氧狀態(tài)下,無(wú)論是正常皮膚還是系統(tǒng)性硬皮病患者皮膚成纖維細(xì)胞膠原蛋白合成均有增加,Ⅰ型和Ⅲ型膠原基因表達(dá)也均
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