缺氧對成年大鼠心臟成纖維細(xì)胞DNA合成及主要基質(zhì)蛋白表達(dá)的影響及機(jī)制.pdf

1、目的:該文旨在觀察缺氧不同時相成年Wistar大鼠心臟成纖維細(xì)胞DNA合成和主要基質(zhì)蛋白表達(dá)的變化及特點(diǎn),觀察缺氧時心臟成纖維細(xì)胞TGF-β1、HIF-1α表達(dá)的變化,以及卡托普利對上述過程的影響,以探討缺氧調(diào)節(jié)心臟成纖維細(xì)胞功能的始動機(jī)制. 方法:分離培養(yǎng)成年Wistar大鼠心臟成纖維細(xì)胞(CFs),處于對數(shù)生長期、生長狀態(tài)一致的第二代細(xì)胞隨機(jī)分為四組:常氧組、缺氧組(1﹪O<,2>)、常氧+卡托普利(10<'-4>M)組、缺氧(1﹪

2、O<,2>)+卡托普利(10<'-4>M)組.通過測定<'3>H-胸腺嘧啶核苷摻入觀察細(xì)胞在缺氧6h、12h、24h時DNA合成的改變,用原位雜交檢測細(xì)胞缺氧1h、2h、4h、8h、12h、24h時主要間質(zhì)蛋白(纖維粘連蛋白、Ⅰ、Ⅲ型膠原、基質(zhì)金屬蛋白酶1,注:Ⅰ、Ⅲ型膠原的表達(dá)為其前α-多肽鏈pro-α=(Ⅰ)collagen、pro-α1(Ⅲ)collagenmRNA的表達(dá),以下簡稱Ⅰ、Ⅲ型膠原)、TGF-β1和HIF-1α表達(dá)的變

3、化.結(jié)論:1.缺氧能夠直接調(diào)節(jié)離體培養(yǎng)的成年wistar大鼠CFsDNA合成和基質(zhì)蛋白表達(dá),這一作用可能是缺氧性心肌纖維化的一個重要機(jī)制.2.成年大鼠CFs在缺氧過程中基質(zhì)蛋白表達(dá)的改變具有一定的時間依賴性,在纖維粘連蛋白、Ⅰ、Ⅲ型膠原以及基質(zhì)金屬蛋白酶1中,缺氧促進(jìn)纖維粘連蛋白的表達(dá)出現(xiàn)最早,其次是Ⅲ型膠原和基質(zhì)金屬蛋白酶1表達(dá)上調(diào),Ⅰ型膠原表達(dá)的增加出現(xiàn)最晚但持續(xù)時間最長.3.缺氧還可促進(jìn)大鼠CFs TGF-β1的表達(dá),此效應(yīng)可能是