rVisfatin干預(yù)人脂肪細(xì)胞的功能研究.pdf

1、肥胖和糖尿病的發(fā)病率越來越高，已成為嚴(yán)重影響人類健康的世界公共衛(wèi)生問題。兩者均是遺傳和環(huán)境等多因素共同作用的結(jié)果，屬于多基因多因素的慢性代謝性疾病。目前研究表明，在肥胖相關(guān)的眾多代謝紊亂中，胰島素抵抗是其中心環(huán)節(jié)，也是肥胖和2型糖尿病共同的發(fā)病基礎(chǔ)，因此改善胰島素抵抗肥胖和2型糖尿病治療的關(guān)鍵之一。 近年來發(fā)現(xiàn)的脂聯(lián)素，作為目前唯一經(jīng)研究證實(shí)對(duì)人體具有保護(hù)作用的脂肪細(xì)胞因子，對(duì)改善胰島素抵抗具有不可低估的關(guān)鍵作用。脂聯(lián)素與胰島素

2、敏感性存在密切聯(lián)系，對(duì)其深入研究可能為控制肥胖患者的代謝紊亂提供新的治療靶點(diǎn)。 內(nèi)臟脂肪素(Visfatin)是新發(fā)現(xiàn)的由內(nèi)臟脂肪細(xì)胞分泌的一種脂肪細(xì)胞因子，可結(jié)合并激活胰島素受體，模擬胰島素作用，從而降低血糖；還能夠促進(jìn)脂肪組織的分化、合成及積聚。而對(duì)于Visfafin與胰島素抵抗之間的關(guān)系目前仍不清楚。現(xiàn)有研究表明Visfailn可能是聯(lián)系肥胖和糖尿病之間的未知環(huán)節(jié)，它的發(fā)現(xiàn)為研究肥胖和糖尿病的發(fā)病機(jī)制增加了新內(nèi)容，可能為糖

3、尿病治療提供一個(gè)新的思路。 第一部分rVisfatin對(duì)人前體脂肪細(xì)胞增殖和分化的影響目的：探討人重組Visfatin蛋白(rVisfatin)對(duì)人前體脂肪細(xì)胞增殖和分化的影響。 方法：取外科手術(shù)病人腹部網(wǎng)膜脂肪組織，進(jìn)行人前體脂肪細(xì)胞的原代培養(yǎng)并于培養(yǎng)24h后誘導(dǎo)其分化。適時(shí)用不同濃度(1ng/ml、50ng/ml)的rVisfatin進(jìn)行干預(yù)，分設(shè)對(duì)照組和藥物干預(yù)組，干預(yù)48h以四甲基偶氮唑鹽(Methyl thia

4、zolyl tetrazolium，MTT)法檢測(cè)人前體脂肪細(xì)胞的增殖，分化10d以油紅O染色法檢測(cè)人脂肪細(xì)胞的分化程度。 結(jié)果：1ng/ml rVisfatin使人前體脂肪細(xì)胞MTT值增加14.3％(P<0.05)，50ng/ml增加17.5％(P<0.05)，經(jīng)rVisfatin干預(yù)的人脂肪細(xì)胞胞漿中，脂滴的堆積多于對(duì)照組。 結(jié)論：rVisfatin能促進(jìn)人前體脂肪細(xì)胞的增殖和分化。 第二部分rVisfati

5、n對(duì)人脂肪細(xì)胞中脂聯(lián)素mRNA表達(dá)的影響目的：探討rVisfatin對(duì)人脂肪細(xì)胞中脂聯(lián)素mRNA表達(dá)的影響。 方法：取外科手術(shù)病人腹部網(wǎng)膜脂肪組織，進(jìn)行人前體脂肪細(xì)胞的原代培養(yǎng)并于培養(yǎng)24h后誘導(dǎo)其分化。適時(shí)用不同濃度(1ng/ml、50ng/ml)的rVisfatin進(jìn)行干預(yù)，分設(shè)對(duì)照組和藥物干預(yù)組，提取分化第10d的脂肪細(xì)胞RNA，逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(Reverse transcription-polymerase chai