脂聯(lián)素通過AMPK和Wnt-β-catenin影響足細胞synaptopodin基因轉(zhuǎn)錄和表達.pdf

1、目的：1、研究脂聯(lián)素對足細胞synaptopodin基因表達的影響。2、AMPK活性對足細胞synaptopodin表達的影響。3、Wnt/β-catenin信號通路對足細胞synaptopodin表達的影響。
　　方法：1、小鼠足細胞的培養(yǎng)，細胞形態(tài)觀察及RT-PCR方法鑒定足細胞。2、用realtime PCR方法觀察高糖或PAN對足細胞synaptopodin表達的影響。3、分別用不同濃度脂聯(lián)素和同一濃度不同時間作用于足細胞

2、，用Realtime PCR方法檢測synaptopodin基因mRNA表達的變化。4、（1）AMPK激動劑AICAR和AMPK抑制劑Compound C干預(yù)足細胞后觀察有或無脂聯(lián)素情況下足細胞synaptopodin表達情況。（2）AMPKα1-siRN A干預(yù)足細胞后觀察有或無脂聯(lián)素情況下足細胞synaptopodin表達的影響。5、（1）GSK-3β抑制劑氯化鋰刺激足細胞Wnt/β-catenin信號，觀察有或無脂聯(lián)素情況下足細胞

3、synaptopodin表達的變化。（2）GSK-3β的siRNA激活足細胞Wnt/β-catenin信號，觀察有或無脂聯(lián)素情況下足細胞synaptopodin表達的變化。
　　結(jié)果：1、synaptopodin僅表達于已分化足細胞，在未分化足細胞無表達。2、高糖或PAN抑制synaptopodin表達。3、不同濃度脂聯(lián)素（0-5ug/ml）作用于足細胞后，可以促進synaptopodin基因mRNA的表達；同一濃度脂聯(lián)素作用不同

4、時間，synaptopodin mRNA表達隨刺激時間的延長而增加。4、AMPK激動劑AICAR促進synaptopodin表達，而AMPK抑制劑CompC和AMPKα1-siRNA抑制了synaptopodin的表達。5、GSK-3β抑制劑氯化鋰和GSK-3β的siRNA抑制足細胞synaptopodin的表達。
　　結(jié)論：脂聯(lián)素可以明顯促進足細胞synaptopodin表達及轉(zhuǎn)錄，而且這種作用可能是通過AMPK和Wnt/β-c