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1、目的:通過對人膀胱組織不同區(qū)域內(nèi)Cajal間質(zhì)細胞(InterstitialCellsofCajal,ICCs)和一氧化氮合酶-1(NitricOxideSynthase-1,NOS-1)陽性神經(jīng)的分布密度以及ICCs細胞超微結(jié)構(gòu)的觀察,探尋ICCs細胞作為人膀胱自主節(jié)律性起搏細胞的分布意義,為在生理學進一步研究人膀胱活動的機制及臨床上治療某些膀胱功能障礙性疾病開拓新思路。
方法:本試驗以人膀胱組織為研究對象,制作冰凍切片,運
2、用激光共聚焦顯微鏡(LaserScanningConfocalMicroscope,LSCM)觀察CD117(Clusterofdifferentiation117)陽性ICCs細胞在人膀胱組織不同區(qū)域的分布;同時結(jié)合CD117、NOS-1免疫熒光雙重標記技術(shù)在同一視野下觀察ICCs細胞與NOS-1陽性神經(jīng)的空間分布關(guān)系,透射電鏡下觀察人膀胱ICCs細胞的超微結(jié)構(gòu)。
結(jié)果:通過LSCM觀察可見CD117呈陽性的ICCs細胞出現(xiàn)
3、在膀胱不同解剖區(qū)域及組織層次中,熒光主要在細胞膜及突起著色,細胞呈梭形,軸向兩端存在突起。解剖區(qū)域中ICCs細胞存在于膀胱頂部最多,膀胱體部次之,膀胱頸部罕見。組織學區(qū)域中ICCs細胞主要存在于肌層和黏膜下層,黏膜層少見。免疫熒光雙重標記可以觀察發(fā)現(xiàn)ICCs細胞同時可表達NOS-1,總體上雙重染色未發(fā)現(xiàn)兩種細胞有明顯的共表達,但可見NOS-1表達陽性神經(jīng)多在ICCs細胞附近;透射電鏡(TransmissionElectronMicros
4、cope,TEM)可見ICCs細胞有圓形或卵圓形的細胞核,基板不連續(xù),細胞內(nèi)存在發(fā)育良好的線粒體,相對豐富的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和游離核糖體,微管微絲罕見,某些ICCs細胞膜上可見內(nèi)陷,胞漿內(nèi)可見液泡,存在類似神經(jīng)突觸樣結(jié)構(gòu);
結(jié)論:在人膀胱不同區(qū)域存在的ICCs細胞形態(tài)學、免疫表型與在消化道發(fā)現(xiàn)的ICCs細胞類似,其在膀胱不同區(qū)域的分布情況不同,ICCs細胞在人膀胱頂部肌層大量存在,很可能構(gòu)成了膀胱活動的第一起搏點,使慢波向膀胱體、膀
5、胱頸傳播,這種分布規(guī)律與膀胱的生理功能相契合,為ICCs細胞作為膀胱舒縮功能的始動細胞提供理論依據(jù),處于體部和頸部的ICCs細胞起著傳遞慢波興奮和協(xié)調(diào)膀胱舒縮的作用.NOS-1陽性神經(jīng)周圍可見ICCs細胞,兩者關(guān)聯(lián)密切且多分布于膀胱肌層及黏膜下區(qū)域,提示NOS-1陽性神經(jīng)可能以ICCs細胞作為靶點共同參與對膀胱舒縮活動的綜控;雙重標記可見ICCs細胞表達NOS-1,推測其也可分泌NO(Nitricoxide,NO),透射電鏡觀察到Caj
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