Nrf2-Bach1調(diào)控γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶在支氣管哮喘發(fā)病中的作用.pdf

1、背景:
　　γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-glutamylcysteine synthetase,γ-GCS)是谷胱甘肽(glutathione,GSH)合成反應(yīng)的限速酶,是一種非常重要的抗氧化酶。體外研究認(rèn)為紅系衍生核因子相關(guān)因子-2(NF-E2 related factor2, Nrf2)在核內(nèi)可以上調(diào)抗氧化酶的表達(dá),BTB-CNC異體同源體1(BTB and CNC homology1,Bach1)則下調(diào)抗氧化酶的表達(dá)。我實(shí)

2、驗(yàn)室前期研究發(fā)現(xiàn)香煙煙霧提取物促進(jìn)體外培養(yǎng)的氣道上皮細(xì)胞Nrf2核轉(zhuǎn)位并上調(diào)γ-GCS的表達(dá)。
　　目的:探討Nrf2/Bach1在整體水平調(diào)控γ-GCS表達(dá)的機(jī)制及在支氣管哮喘發(fā)病中的作用。
　　方法:
　　實(shí)驗(yàn)分兩部分。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)部分:38只健康雄性豚鼠隨機(jī)分為對(duì)照組(A組)、哮喘組(B組)和地塞米松治療組(C組),卵蛋白致敏法復(fù)制哮喘模型,檢測(cè)三組豚鼠肺組織勻漿中丙二醛濃度。檢測(cè)肺組織、肺泡灌洗液中細(xì)胞Nrf2、B

3、ach1、γ-GCS mRNA和蛋白質(zhì)的表達(dá)。臨床實(shí)驗(yàn)部分:健康對(duì)照組、哮喘患者治療前、治療后均行肺功能檢測(cè)。檢測(cè)三組血漿丙二醛(MDA)濃度;檢測(cè)各組痰細(xì)胞中Nrf2、Bach1、γ-GCS蛋白質(zhì)和mRNA的表達(dá)。
　　結(jié)果:
　　(1)豚鼠肺組織中丙二醛濃度(nmol/mg.prot)哮喘組高于對(duì)照組和治療組(P均<0.05)。哮喘患者血漿丙二醛濃度高于健康對(duì)照組和治療后組(P均<0.01)。
　　(2)豚鼠肺組織

4、和BALF細(xì)胞中γ-GCSmRNA表達(dá)B組低于A組和C組(P均<0.05);Nrf2、Bach1三組間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　(3)豚鼠肺組織和BALF細(xì)胞中γ-GCS蛋白質(zhì)表達(dá)B組低于A組和C組(P均<0.01);Nrf2蛋白質(zhì)細(xì)胞核內(nèi)表達(dá)B組低于A組和C組(P均<0.01);Bach1蛋白質(zhì)細(xì)胞核內(nèi)表達(dá)B組高于A組和C組(P均<0.01)。
　　(4)哮喘患者痰中細(xì)胞內(nèi)γ-GCSmRNA、蛋白表達(dá)及Nrf2蛋白質(zhì)細(xì)胞核內(nèi)表達(dá)

5、治療后高于治療前(P均<0.01),而B(niǎo)ach1蛋白質(zhì)細(xì)胞核內(nèi)表達(dá)治療后低于治療前(P<0.01)。
　　(5)豚鼠肺組織、BALF細(xì)胞和哮喘患者痰中細(xì)胞內(nèi)γ-GCS mRNA表達(dá)與 Nrf2核內(nèi)表達(dá)呈正相關(guān)(P均<0.01),與Bach1核內(nèi)表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(P均<0.01)。
　　結(jié)論:
　　氧化/抗氧化失衡在支氣管哮喘發(fā)病中起重要作用,γ-GCS有保護(hù)作用。γ-GCS的表達(dá)由細(xì)胞核內(nèi)Nrf2和Bach1蛋白水平調(diào)控,