氨溴索對(duì)哮喘大鼠肺組織激活蛋白-1和γ-谷胺酰半胱氨酸合成酶表達(dá)的影響.pdf

1、背景：經(jīng)典理論認(rèn)為，哮喘是以嗜酸粒細(xì)胞(Eosinophil，EOS)浸潤(rùn)為主的氣道炎癥，但近年來很多研究發(fā)現(xiàn)，氧化/抗氧化失衡在哮喘的發(fā)生發(fā)展中也起著重要作用。氨溴索(ambroxol，AMB)是一種臨床常用祛痰藥，近年來研究發(fā)現(xiàn)，其具有一定抗氧化作用，在哮喘治療中具有一定的應(yīng)用價(jià)值。
　　 目的：通過觀察氨溴索對(duì)哮喘大鼠肺組織病理的改變以及對(duì)哮喘大鼠肺組織及支氣管肺泡灌洗液中激活蛋白-1(activator protein-

2、1，AP-1)和γ-谷胺酰半胱氨酸合成酶(γ-glutamylcysteine synthetase，γ-GCS)蛋白的影響，初步探討氨溴索對(duì)哮喘大鼠氣道氧化/抗氧化系統(tǒng)的作用及其可能的作用機(jī)制。
　　 方法：將30只雄性Sprauge-Dawley(SD)大鼠隨機(jī)分為3組：空白對(duì)照組、哮喘模型組和氨溴索處理組。哮喘模型組和氨溴索處理組分別于第1d和第8d向大鼠腹腔內(nèi)注射抗原液1ml，(含有卵清蛋白(ovalbumin，OVA)

3、100mg，氫氧化鋁100mg)致敏。第15天開始霧化吸入1％OVA(w/v)激發(fā)氣道反應(yīng)，每次20分鐘，每日1次，共7天?？瞻讓?duì)照組則于第1、8天腹腔內(nèi)注射生理鹽水1ml，第15天開始霧化吸入生理鹽水，每次20分鐘，每日1次，共7天。
　　 氨溴索處理組致敏同時(shí)給予腹腔注射氨溴索50mg.kg-1.d-1，空白對(duì)照組和哮喘模型組則同時(shí)給予等量生理鹽水腹腔注射，共21天。各組動(dòng)物于最后一次霧化吸入后24小時(shí)行支氣管肺泡灌洗，收集

4、支氣管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid，BALF)。采用HE染色觀察肺組織病理的改變，免疫細(xì)胞化學(xué)染色法檢測(cè)支氣管肺泡灌洗液中AP-1(c-Jun和c-Fos亞單位)及γ-GCS的表達(dá)水平以及免疫組織化學(xué)法觀察AP-1(c-Jun和c-Fos亞單位)及γ-GCS在肺組織中的表達(dá)。
　　 結(jié)果：(1)激發(fā)過程中哮喘模型組大鼠出現(xiàn)呼吸窘迫癥狀(呼吸急促、青紫等)，氨溴索處理組大鼠激發(fā)的癥狀與哮喘模

5、型組相比有明顯減輕，空白對(duì)照組大鼠未見呼吸窘迫等癥狀。
　　 (2)各組大鼠肺組織病理變化：空白對(duì)照組顯示大鼠肺組織可見肺泡大小均一且肺泡壁薄，支氣管上皮完整，周圍幾乎無炎性細(xì)胞浸潤(rùn)及其分泌物。哮喘模型組顯示支氣管粘膜上皮水腫伴有局部的脫落，基底膜的增厚，粘液腺增多，管壁的各層均可見嗜酸性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和單核細(xì)胞的浸潤(rùn)。氨溴索處理組顯示病變范圍、程度均較模型組明顯減輕；
　　 (3)肺組織和支氣管肺泡灌洗液AP-1(c

6、-Jun、c-Fos亞單位)蛋白表達(dá)：哮喘模型組肺組織及支氣管肺泡灌洗液中c-Jun蛋白和c-Fos蛋白的表達(dá)水平與空白對(duì)照組比較明顯升高(P<0.01)；氨溴索處理組c-Jun蛋白和c-Fos蛋白的表達(dá)水平與哮喘模型組比較明顯降低(P<0.01)，但仍高于空白對(duì)照組(P<0.01)；
　　 (4)肺組織和支氣管肺泡灌洗液γ-GCS蛋白表達(dá)：哮喘模型組肺組織及支氣管肺泡灌洗液γ-GCS蛋白的表達(dá)水平與空白對(duì)照組比較明顯升高(P<