蘋(píng)果多酚的分離提純及其抗氧化性研究.pdf

1、蘋(píng)果多酚是一類(lèi)很強(qiáng)的抗氧化劑，其抗氧化能力等多種生物功能活性是茶多酚的100倍。蘋(píng)果多酚除了具有很強(qiáng)的抗氧化作用外還有抗變異原性、防齲齒作用、抑制血壓上升等生理功能，極具開(kāi)發(fā)潛力。 對(duì)具有相似功能性成分的三種水果(蘋(píng)果、梨和葡萄)和兩種蔬菜(西紅柿和洋蔥)的抗氧化性研究發(fā)現(xiàn)，其乙醇浸提液的抗氧化能力大小順序?yàn)槠咸眩咎O(píng)果＞梨＞西紅柿＞洋蔥(FRAP法測(cè)定)；用DPPH法測(cè)定順序?yàn)椋何骷t柿＞蘋(píng)果＞梨＞葡萄＞洋蔥。綜合比較，蘋(píng)果在這兩

2、種不同的抗氧化性測(cè)定方法中都呈現(xiàn)很好的抗氧化性，所以后期研究主要以蘋(píng)果為原料。將五種果蔬的乙醇浸提液經(jīng)過(guò)SephadexLH-20分離后，所得分離產(chǎn)物的抗氧化性與相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)品的抗氧化性進(jìn)行比較發(fā)現(xiàn)，在分離產(chǎn)物中除了主要成分外還有其它物質(zhì)，這些物質(zhì)影響著分離產(chǎn)物的抗氧化性。 采用SephadexLH-20對(duì)蘋(píng)果多酚進(jìn)行分離提純，并研究了柱長(zhǎng)徑比和流速對(duì)各種酚類(lèi)的得率、解析率以及總的解析率的影響。結(jié)果表明，當(dāng)柱長(zhǎng)徑比為20×2.5時(shí)

3、，中性酚類(lèi)解析率、總的解析率和表兒茶素得率都是最高的；當(dāng)吸附流速為1.5ml/min，解析流速為1.0ml/min時(shí)，中性酚類(lèi)解析率、總的解析率以及綠原酸得率最大。對(duì)柱長(zhǎng)徑比和流速進(jìn)行單因素方差分析，發(fā)現(xiàn)流速對(duì)各項(xiàng)指標(biāo)的影響都呈顯著性，所以對(duì)蘋(píng)果多酚進(jìn)行分離時(shí)，要嚴(yán)格控制流速。 對(duì)喬納金、黃元帥、富士和國(guó)光在果實(shí)成熟過(guò)程中的總酚含量變化的研究發(fā)現(xiàn)，四個(gè)品種的總酚含量在果實(shí)成熟過(guò)程中都會(huì)有不同程度的下降；而且果實(shí)的成熟度對(duì)四個(gè)品種

4、的總的鐵還原能力沒(méi)有影響，對(duì)清除DPPH自由基能力的影響則因品種而有差異；四個(gè)品種的總酚含量與各自的總的鐵還原能力之間的相關(guān)性都不顯著，與DPPH自由基清除能力之間的相關(guān)性較好。 對(duì)四個(gè)蘋(píng)果品種中的主要酚類(lèi)在果實(shí)成熟過(guò)程中的含量變化及其抗氧化性變化的研究表明，四個(gè)品種的原花青素類(lèi)的含量變化影響總酚的含量變化，國(guó)光中的表兒茶素類(lèi)和綠原酸類(lèi)的含量比其它三個(gè)品種的相應(yīng)分離產(chǎn)物的含量高。四個(gè)品種中的表兒茶素類(lèi)和原花青素類(lèi)的鐵還原能力對(duì)總

5、的鐵還原能力的影響大；在喬納金、黃元帥和富士中，對(duì)總的清除DPPH自由基能力的影響最大的是綠原酸類(lèi)分離產(chǎn)物，在國(guó)光中起主要影響的是多聚體原花青素類(lèi)。 采用SPSS數(shù)學(xué)統(tǒng)計(jì)分析軟件對(duì)表兒茶素類(lèi)和綠原酸類(lèi)分離產(chǎn)物中的各組分的相對(duì)含量與鐵還原能力和清除DPPH自由基能力之間的關(guān)系進(jìn)行了回歸分析。由回歸方程可見(jiàn)，表兒茶素類(lèi)分離產(chǎn)物中的(表)兒茶素含量對(duì)總的抗氧化性的影響最大，其余各組分之間雖然有相互作用，但對(duì)總的抗氧化性的影響較??；綠原

6、酸類(lèi)分離產(chǎn)物中的綠原酸含量對(duì)總的抗氧化能力影響最大，另外兩種物質(zhì)(綠原酸的同分異構(gòu)體)之間的抗氧化性有相互作用，但對(duì)總的抗氧化性影響很小。 對(duì)表兒茶素類(lèi)和綠原酸類(lèi)分離產(chǎn)物中的未知成分進(jìn)行LC-MS鑒定，初步推斷出在綠原酸類(lèi)分離產(chǎn)物中除了綠原酸外，其它兩種物質(zhì)是綠原酸的同分異構(gòu)體4-咖啡?？鼘幩岷?-咖啡?？鼘幩帷Ｔ诒韮翰杷仡?lèi)分離產(chǎn)物中，已經(jīng)初步推斷出四種物質(zhì)，分別為綠原酸，肉桂酸或?qū)ο愣顾崤c奎寧酸的酯化產(chǎn)物，槲皮素葡萄糖苷以及甲