排毒保腎湯含藥血清對TGF-β1刺激的人腎小管上皮細胞表達α-SMA及CTGF的影響.pdf

1、目的：腎間質纖維化是幾乎所有慢性腎臟病(chronic kidney disease,CKD)走向終末期腎衰竭的共有病理途徑。由于其所涉及的細胞因子網絡及信號通路非常復雜，因此，盡管腎臟病學者做了大量相關研究并取得了一定的成效，但目前臨床上仍然缺乏真正有效的治療措施，抗腎臟纖維化手段相對單一?；谏鲜鏊伎迹罅Πl(fā)掘中草藥潛力，加強療效顯著的臨床驗方的研究是十分必要的。本實驗旨在觀察經驗方排毒保腎湯含藥血清對轉化生長因子-β1(TGF-β

2、1)刺激的人腎小管上皮細胞(HKC)表達結締組織生長因子(CTGF)及α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)的影響，以進一步探討該方阻抑腎間質纖維化，保護腎臟的可能作用機制。
　　 方法：制備排毒保腎湯含藥血清及正常兔血清。將體外培養(yǎng)的HKC分為5組進行處理(單純TGF-β1干預組、低劑量含藥血清組、中劑量含藥血清組、高劑量含藥血清組及正常對照組)采用RT-PCR及免疫組化法檢測不同劑量的兔含藥血清對TGF-β1(10ng/ml)誘導

3、下的HKC表達α-SMA mRNA及CTGF蛋白水平的影響。
　　 結果：采用RT-PCR檢測α-SMA mRNA的表達，經TGF-β1誘導48h后，單純干預組α-SMAmRNA表達較正常對照組顯著增加(p<0.01),而不同劑量含藥血清均可抑制α-SMAmRNA表達。隨著排毒保腎方含藥血清劑量升高，α-SMAmRNA表達量呈下降趨勢，其中高劑量與低劑量含藥血清組比較，差異具有統(tǒng)計學意義(p<0.01)。采用免疫組化法檢測CTG