佐匹克隆對(duì)映體的高效液相色譜流動(dòng)相添加劑手性拆分方法研究.pdf

1、手性藥物的兩個(gè)對(duì)映異構(gòu)體是組成上相同，能夠互成鏡像的一對(duì)分子，構(gòu)象上的差異導(dǎo)致對(duì)映體分子在生物活性、毒理和代謝機(jī)理上都不同，往往一種旋光異構(gòu)體有效，而它的對(duì)映體藥效很小，甚至沒有藥效或者具有相反的藥效。雖然藥物對(duì)映異構(gòu)體表現(xiàn)出的藥效差別非常大，但是目前相當(dāng)多的手性藥物是以外消旋體的形式出售。美國食品與藥品監(jiān)督管理局正式公布了關(guān)于手性藥物開發(fā)銷售的準(zhǔn)則性文件，明確指出新上市的手性藥物一定要注明對(duì)映體純度，這提高了醫(yī)藥界對(duì)高旋光純度的手性藥

2、物的需求。因此在醫(yī)藥工業(yè)中，化合物對(duì)映體的拆分顯得日益重要。在眾多的手性拆分技術(shù)中，高效液相色譜(highperformanceliquidchromatography，HPLC)法是最簡單、重復(fù)性最好以及用途最廣泛的方法，在手性藥物的分離方面表現(xiàn)尤為突出。本文建立了手性流動(dòng)相添加劑液相色譜法(CMPS)拆分佐匹克隆對(duì)映異構(gòu)體：研究了反相液相色譜系統(tǒng)中β-環(huán)糊精(β-cycoldextrin)與佐匹克隆對(duì)映異構(gòu)體手性包合的選擇性和色譜保

3、留行為。 在實(shí)驗(yàn)中，首先通過Doehlert實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)優(yōu)化分離條件，建立了分離度與β-環(huán)糊精以及磷酸鹽緩沖液濃度關(guān)系的數(shù)學(xué)模型，并通過實(shí)驗(yàn)予以驗(yàn)證。 其次，建立了β-環(huán)糊精為手性流動(dòng)相添加劑對(duì)佐匹克隆對(duì)映異構(gòu)體拆分的高效液相色譜方法，色譜條件為色譜柱：ZorbaxRx-C18柱(5μm,4.6mm×250mm)；流動(dòng)相為0.12mol/L磷酸鹽緩沖液：甲醇(75∶25，V/V)，其中含9.0mmol/L的β-環(huán)糊精，pH6

4、.0，流速為0.8ml/min；檢測(cè)波長305nm；進(jìn)樣量20μl；柱溫為25℃。 第三，探討了β-環(huán)糊精作為手性流動(dòng)像相添加劑對(duì)佐匹克隆對(duì)映異構(gòu)體的手性選擇性和色譜保留行為的影響，系統(tǒng)研究了緩沖液濃度、pH值、甲醇有機(jī)溶劑強(qiáng)度以及溫度對(duì)包合物穩(wěn)定常數(shù)的影響，并做出了定量的描述。在各種實(shí)驗(yàn)條件下得到的1/k'對(duì)β-環(huán)糊精的濃度呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系，這表明，佐匹克隆對(duì)映異構(gòu)體與β-環(huán)糊精之間相互作用是形成的1∶1的環(huán)糊精包合物。在最