3-MA抑制自噬在胰腺癌細胞抵抗失巢凋亡中的作用.pdf

1、中山大學碩士學位論文3-MA抑制自噬在胰腺癌細胞抵抗失巢凋亡中的作用姓名：莊燕妍申請學位級別：碩士專業(yè)：內(nèi)科學指導教師：張世能20100527腸癌、肺癌等癌細胞體外培養(yǎng)實驗都得到了證實?；谝认侔盒猿潭雀呒霸缙谵D(zhuǎn)移、易復發(fā)的特點，我們推測其可能具備較強的抵抗失巢凋亡的能力。自噬( a u t o p h a g y ) 是細胞利用溶酶體降解自身大分子物質(zhì)和受損的細胞器的生物學過程，它是細胞維持自穩(wěn)、保證生存的重要方法之一，尤其是細胞在

2、面臨缺氧、營養(yǎng)供應不足、生長因子缺乏等不利條件時，其往往通過增加自噬活性來保證細胞的生存。根據(jù)細胞內(nèi)底物運送到溶酶體腔方式的不同可分為：大自噬、小自噬及分子伴侶介導的自噬。正常上皮細胞具有基礎水平的自噬，且自噬與感染免疫、腫瘤耐藥等也有關。研究表明，多個基因及信號途徑參與自噬作用，包括P T E N 基因、B e c l i n l 基因、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激、P 1 3 K ／A K T 途徑、R A S ．R A F ．1 ．M E K ．E

3、 R K l ／2 途徑等，其中P 1 3 K ／A K T 是參與失巢凋亡的一個重要途徑，因此推測，當細胞處于失巢的不良環(huán)境時，細胞可以通過作用彼此共同的途徑P 1 3 U A K T 途徑來增強自噬水平緩解代謝壓力、維持細胞生存抵抗失巢凋亡。3 - M A ( 3 ．甲基腺嘌呤) 是常見的自噬抑制劑，其為I I I 型P 1 3 K ( h V p s 3 4 ) 的抑制劑，能抑制胞漿型L C 3I 向自噬體膜蛋白L C 3 I I

4、 的轉(zhuǎn)化從而抑制自噬的激活。因此，本實驗利用3 - M A 抑制自噬并通過研究胰腺癌細胞的凋亡率、增殖、遷移了解自噬在其中發(fā)揮的作用。研究目的通過軟瓊脂培養(yǎng)法及p o l y —H E M A 懸浮培養(yǎng)法模擬胰腺癌細胞失巢狀態(tài)，并使用自噬抑制劑3 ．甲基腺嘌呤( 3 ．M A ) 抑制細胞自噬水平，檢測凋亡率、細胞增殖、遷移能力，觀察自噬在胰腺癌細胞抵抗失巢凋亡中的作用及其對增殖、遷移的影晌，從而開辟遏制胰腺癌抵抗失巢凋亡能力的新途徑，