自噬對卵巢癌細胞耐藥及失巢凋亡抵抗的調(diào)控作用.pdf

1、研究目的與方法:
　　1.采用免疫組化及蛋白印跡法分析自噬效應分子在組織及細胞株中的表達情況,明確自噬與卵巢癌發(fā)生、耐藥及轉(zhuǎn)移的相關性;
　　2.采用凋亡和自噬相關分子生物學技術,探索具有雙刃劍效應的自噬在卵巢癌細胞耐藥及轉(zhuǎn)移中發(fā)揮的具體調(diào)控作用,為卵巢癌細胞的耐藥轉(zhuǎn)移機制提供研究新視角;
　　3.構(gòu)建失巢凋亡的模型研究細胞間(ECM)信號通路在調(diào)控細胞自噬,進而導致卵巢癌細胞失巢凋亡抵抗中的作用,為開發(fā)卵巢靶向治療的

2、新方法提供理論依據(jù)。
　　研究結(jié)果
　　1.卵巢癌化療敏感臨床標本與耐藥標本相比,PP2Ac的表達明顯增高,而LC3的表達明顯降低,兩者之間存在相關性。
　　2.在卵巢癌耐藥細胞中,自噬的表達水平明顯增高,而且有明顯的CDDP濃度依賴性,而且3-MA或者siRNA抑制自噬表達可以增加細胞對CDDP藥物的敏感性。
　　3.PP2Ac在卵巢耐藥細胞中的表達降低。PP2Ac對LC3的表達有明顯的負調(diào)控作用。通過PP2A

3、c質(zhì)粒過表達或者小劑量FTY720增加PP2A活性,CDDP誘導耐藥細胞自噬明顯降低,增加了細胞對藥物的敏感性。而干擾PP2Ac可以增強耐藥細胞自噬表達,增強其對CDDP藥物的耐受性。
　　4.卵巢癌敏感和耐藥細胞株裸鼠原位成瘤模型顯示:鉑類耐藥細胞成瘤其自噬表達明顯高于敏感細胞成瘤。
　　5.卵巢癌上皮細胞模擬失巢凋亡的懸浮培養(yǎng)、Matrigel鋪膠培養(yǎng)、常規(guī)培養(yǎng)中,失巢凋亡培養(yǎng)細胞自噬表達明顯增強,其次為鋪膠培養(yǎng)。而且整

4、合素表達在失巢凋亡中明顯降低。
　　研究結(jié)論
　　本課題主要針對臨床上出現(xiàn)的大量卵巢癌化療耐藥,以期探尋新的靶向治療克服耐藥為目的。通過臨床病理標本、細胞分子生物學實驗和動物模型研究自噬在卵巢癌耐藥及失巢凋亡抵抗中所起到的重要作用及其調(diào)控機制。
　　1.在卵巢癌耐藥細胞中自噬起到保護性作用,是造成腫瘤耐藥的重要原因之一,抑制自噬可以促進耐藥細胞對腫瘤的敏感性。
　　2.PP2Ac負調(diào)控卵巢癌耐藥細胞自噬作用,小劑