健側(cè)頸7移位術(shù)治療中樞神經(jīng)損傷后上肢運(yùn)動(dòng)功能障礙的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、文章主要以下幾個(gè)方面展開論述：
　　 第一部分：
　　 目的：通過比較不同程度損傷的腦外傷動(dòng)物模型，確立一種適用于長(zhǎng)期縱向研究的腦外傷模型及相關(guān)評(píng)價(jià)體系。
　　 方法：取清潔級(jí)雌性SD大鼠32只，隨機(jī)分成四組，均選取左側(cè)大腦運(yùn)動(dòng)皮層作為毀損側(cè)。A組：輕度控制性皮層撞擊組；B組：中度控制性皮層撞擊組；C組：重度控制性皮層撞擊組；D組：?jiǎn)蝹?cè)運(yùn)動(dòng)皮層擴(kuò)大切除組。各組分別于術(shù)后不同時(shí)間點(diǎn)通過動(dòng)物行為學(xué)觀察大鼠癱瘓肢體運(yùn)動(dòng)

2、功能障礙的情況，并進(jìn)行神經(jīng)功能學(xué)評(píng)分。另外，應(yīng)用HE染色法觀察大鼠毀損額皮質(zhì)區(qū)和海馬CA1區(qū)的病理學(xué)改變情況。
　　 結(jié)果：術(shù)后2周，各實(shí)驗(yàn)組大鼠右(患)側(cè)上肢均表現(xiàn)為不同程度的運(yùn)動(dòng)功能障礙，C組和D組大鼠無法主動(dòng)使用患爪抓取食物；大鼠在不對(duì)稱實(shí)驗(yàn)中患肢使用次數(shù)減少，滑動(dòng)次數(shù)增加。隨著觀察時(shí)間的延長(zhǎng)，各組大鼠患肢運(yùn)動(dòng)功能均發(fā)生了一定程度的自發(fā)性恢復(fù)。術(shù)后12周，A、B組大鼠右側(cè)上肢抓取功能均恢復(fù)接近術(shù)前水平，抓取成功率分別為(7

3、8±4)％和(74±3)％。C、D組大鼠右上肢仍表現(xiàn)為較明顯的抓取功能障礙，四組之間數(shù)據(jù)比較存在顯著性差異(P＜0.05)，A組與B組之間、C組與D組之間差異不明顯(P＞0.05)。肢體不對(duì)稱實(shí)驗(yàn)中，A、B組大鼠前肢活動(dòng)度(FLA)及滑動(dòng)比率(sliding score)均恢復(fù)接近術(shù)前水平。C、D組大鼠直立時(shí)右側(cè)上肢初次觸壁次數(shù)明顯增多，但是觸壁后立即沿筒壁滑落，無法完成水平或垂直移動(dòng)，C組大鼠右側(cè)前肢活動(dòng)度及滑動(dòng)比率均優(yōu)于D組(如圖)

4、。各組之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。術(shù)后12周大腦組織冠狀位切片HE染色結(jié)果顯示，各組大鼠腦損傷側(cè)均出現(xiàn)不同程度皮質(zhì)部腦組織缺失，其中C組及D組缺損面積最大，冠狀位切片殘存面積分別為整個(gè)大腦切片面積的(81.15±4.15)％、(80.66±5.36)％，兩者比較無明顯差異(P＞0.05)；A、B組大腦冠狀位切片殘存面積分別為整個(gè)大腦切片面積的(96.12±7.68)％和(93.24±4.41)％，病灶體積分析的結(jié)果顯示四組之間存在

5、顯著性差異。顯微鏡下觀察撞擊側(cè)皮質(zhì)周邊區(qū)域出現(xiàn)神經(jīng)元空泡樣變，膠質(zhì)細(xì)胞增生明顯，海馬區(qū)域神經(jīng)元廣泛變性壞死，排列稀疏，C組表現(xiàn)較其他三組明顯。
　　 結(jié)論：1.重度控制性皮層撞擊損傷模型及單側(cè)皮層擴(kuò)大切除模型患側(cè)上肢運(yùn)動(dòng)功能障礙持久、穩(wěn)定，重復(fù)性好且操作簡(jiǎn)便，適用于腦損傷后患肢的運(yùn)動(dòng)功能的長(zhǎng)期、縱向研究；2.肢體不對(duì)稱實(shí)驗(yàn)及技巧性抓取實(shí)驗(yàn)敏感度高，能夠客觀、準(zhǔn)確地評(píng)估中樞神經(jīng)損傷后患側(cè)上肢運(yùn)動(dòng)功能損傷情況。
　　 第二部

6、分大鼠創(chuàng)傷性腦損傷后行為學(xué)及大腦可塑性變化的實(shí)驗(yàn)研究
　　 目的：觀察大鼠顱腦外傷后行為學(xué)變化及微管相關(guān)蛋白-2(MAP-2)、突觸素(SYN)在中樞神經(jīng)系統(tǒng)表達(dá)的變化，為探討顱腦外傷后神經(jīng)元再生和修復(fù)機(jī)制及臨床治療腦外傷后慢性期患肢運(yùn)動(dòng)功能障礙提供理論依據(jù)。
　　 方法：取清潔級(jí)雌性SD大鼠80只，隨機(jī)分成10組，每組8只。分別為正常對(duì)照組、單側(cè)運(yùn)動(dòng)皮層擴(kuò)大切除模型術(shù)后2周、4周、6周、8周、3個(gè)月、5個(gè)月、7個(gè)月、1

7、0個(gè)月和12個(gè)月共10組。術(shù)后通過動(dòng)物行為學(xué)觀察大鼠癱瘓肢體運(yùn)動(dòng)功能障礙的情況，并進(jìn)行神經(jīng)功能學(xué)評(píng)分。另外采用免疫組織化學(xué)技術(shù)，檢測(cè)大鼠損傷灶周邊皮層及對(duì)側(cè)皮層運(yùn)動(dòng)功能區(qū)突觸素(synaptophysin，SYN)及微管相關(guān)蛋白-2(microtubuleassociated protein-2，MAP-2)的表達(dá)變化情況。
　　 結(jié)果：1.行為學(xué)評(píng)估：術(shù)后2周實(shí)驗(yàn)組大鼠均表現(xiàn)為右側(cè)上肢癱瘓，大鼠無法主動(dòng)使用患爪抓取食物；實(shí)驗(yàn)組

8、組大鼠上肢活動(dòng)度(FLA)為：0.982±0.063，與正常對(duì)照組比較有顯著性差異(P＜0.05)；右側(cè)上肢滑動(dòng)比率(sliding score)為：0.341±0.033，與正常對(duì)照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)；隨著時(shí)間的推移，實(shí)驗(yàn)組大鼠癱瘓(右側(cè))上肢運(yùn)動(dòng)功能逐漸恢復(fù)。術(shù)后5個(gè)月實(shí)驗(yàn)組大鼠患爪抓取功能恢復(fù)趨于穩(wěn)定，抓取成功率為(31±4)％，顯著低于正常對(duì)照組(P＜0.05)。各實(shí)驗(yàn)組之間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；

9、術(shù)后5、7、10、12組間比較無明顯差異(P＞0.05)。肢體不對(duì)稱實(shí)驗(yàn)中，實(shí)驗(yàn)組大鼠右側(cè)上肢運(yùn)動(dòng)功能逐漸恢復(fù)。術(shù)后3個(gè)月達(dá)最大值，然后逐漸下降。各實(shí)驗(yàn)組之間右側(cè)上肢肢體活動(dòng)度及滑動(dòng)比率比較，有顯著性差異(P＜0.01)；術(shù)后5、7、10、12組間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。2.免疫組化檢測(cè)：術(shù)后2周，實(shí)驗(yàn)組大鼠損傷皮層周圍區(qū)域MAP-2免疫組化陽(yáng)性產(chǎn)物表達(dá)增高，表達(dá)強(qiáng)度為(7.24±0.63)％，與正常對(duì)照組比較有顯著性差異

10、(P＜0.05)。隨后各個(gè)時(shí)間點(diǎn)MAP-2表達(dá)減弱，各實(shí)驗(yàn)組與正常對(duì)照組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。術(shù)后2周組與其他各實(shí)驗(yàn)組比較有顯著性差異(P＜0.05)，余各組兩兩比較差異無顯著性(P＞0.05)。術(shù)后2周，實(shí)驗(yàn)組大鼠損傷皮層周圍區(qū)域突觸素免疫組化陽(yáng)性產(chǎn)物表達(dá)達(dá)到高峰，表達(dá)強(qiáng)度為(4.7±0.24)％，表達(dá)強(qiáng)度高于正常對(duì)照組，但兩者比較差異無顯著性(P＞0.05)。隨后各時(shí)間點(diǎn)突觸素表達(dá)逐漸減弱，實(shí)驗(yàn)組與正常對(duì)照組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)

11、差異(P＞0.05)。術(shù)后各實(shí)驗(yàn)組之間比較，無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)
　　 結(jié)論：1.單側(cè)運(yùn)動(dòng)皮層擴(kuò)大切除術(shù)后，大鼠患肢運(yùn)動(dòng)功能表現(xiàn)為一定程度的自發(fā)性恢復(fù)，這種恢復(fù)是局限的，不徹底的；損傷后，損傷對(duì)側(cè)皮層通過同側(cè)通路參與患肢支配；2.單側(cè)運(yùn)動(dòng)皮層擴(kuò)大切除術(shù)后早期，損傷區(qū)周圍皮層MAP-2、SYN表達(dá)增高，術(shù)后2周達(dá)到高峰，隨后逐漸減弱；損傷后，損傷區(qū)周圍皮層發(fā)生功能重組，MAP-2、突觸素在其中參與神經(jīng)再生及突觸發(fā)生

12、　　 第三部分健側(cè)頸7移位術(shù)治療中樞神經(jīng)損傷后上肢運(yùn)動(dòng)功能障礙的實(shí)驗(yàn)研究
　　 目的：探討健側(cè)頸7(C7)神經(jīng)移位治療中樞神經(jīng)損傷傷后一側(cè)上肢運(yùn)動(dòng)功能障礙的可行性，為腦外傷后慢性期患肢運(yùn)動(dòng)功能障礙的治療提供理論依據(jù)。
　　 方法：取清潔級(jí)雌性SD大鼠80只，隨機(jī)分成10組，每組8只。分別為正常對(duì)照組、單側(cè)運(yùn)動(dòng)皮層擴(kuò)大切除+健側(cè)頸7神經(jīng)移位模型術(shù)后2周、4周、6周、8周、3個(gè)月、5個(gè)月、7個(gè)月、10個(gè)月和12個(gè)月共10組

13、。術(shù)后通過動(dòng)物行為學(xué)觀察，了解大鼠癱瘓肢體運(yùn)動(dòng)功能障礙的情況，并進(jìn)行神經(jīng)功能學(xué)評(píng)分。同時(shí)采用周圍神經(jīng)電生理技術(shù)及電鏡技術(shù)，記錄患側(cè)肱三頭肌CMAP的潛伏期、波幅，了解健側(cè)頸7神經(jīng)移位術(shù)后新生有髓神經(jīng)纖維數(shù)量及功能。然后采用免疫組織化學(xué)技術(shù)，檢測(cè)大鼠損傷灶周邊皮層及對(duì)側(cè)皮層運(yùn)動(dòng)功能區(qū)突觸素(SYN)及微管相關(guān)蛋白-2(MAP-2)的表達(dá)變化情況。
　　 結(jié)果：1.行為學(xué)評(píng)估：術(shù)后2周實(shí)驗(yàn)組大鼠均表現(xiàn)為右側(cè)上肢癱瘓，隨后實(shí)驗(yàn)組大鼠癱

14、瘓(右側(cè))上肢運(yùn)動(dòng)功能逐漸恢復(fù)。術(shù)后7個(gè)月實(shí)驗(yàn)組大鼠患爪抓取功能達(dá)最大值，抓取成功率為(61±5)％，與正常對(duì)照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。各實(shí)驗(yàn)組之間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)；術(shù)后7、10、12月組間比較無明顯差異(P＞0.05)。術(shù)后7月組大鼠右上肢肢體活動(dòng)度水平接近正常對(duì)照組，兩者比較無明顯差異(P＞0.05)；上肢滑動(dòng)比率兩組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，后者優(yōu)于前者(P＜0.05)。各實(shí)驗(yàn)組之間右側(cè)上肢肢體活動(dòng)度及滑動(dòng)

15、比率比較，有顯著性差異(P＜0.01)；術(shù)后7、10、12月組間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。2.周圍神經(jīng)電生理及組織學(xué)檢測(cè)：術(shù)后2周，實(shí)驗(yàn)組大鼠右側(cè)肱三頭肌無CMAP引出。隨后各實(shí)驗(yàn)組大鼠右側(cè)肱三頭肌均可記錄到CMAP，波幅逐漸增大，潛伏期逐漸縮短，至術(shù)后7個(gè)月肱三頭肌CMAP波幅恢復(fù)率及潛伏期延遲率分別為75.65±6.67％和119.76±8.34％，CMAP波幅恢復(fù)率與正常對(duì)照組比較有顯著性差異(P＜0.05)；CMAP

16、潛伏期延遲率與正常對(duì)照組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。術(shù)后2周，電鏡組織切片觀察可見少量新生薄髓鞘纖維，且纖維直徑纖細(xì)。隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，新生有髓神經(jīng)纖維數(shù)量逐漸增多，至術(shù)后7個(gè)月達(dá)最大值各實(shí)驗(yàn)組間比較有顯著性差異(P＜0.01)；術(shù)后5、7、10、12月組間無明顯差異(P＞0.05)。3.免疫組化檢測(cè)：術(shù)后2周，實(shí)驗(yàn)組大鼠損傷皮層周圍區(qū)域MAP-2免疫組化陽(yáng)性產(chǎn)物表達(dá)增強(qiáng)，隨后逐漸降低。至術(shù)后5個(gè)月?lián)p傷對(duì)側(cè)皮層MAP-2表達(dá)增強(qiáng)

17、，7個(gè)月達(dá)高峰，然后降低。各組之間比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。術(shù)后2周，實(shí)驗(yàn)組大鼠損傷皮層周圍區(qū)域突觸素表達(dá)增強(qiáng)，隨后逐漸降低。至術(shù)后3個(gè)月?lián)p傷對(duì)側(cè)皮層突觸素表達(dá)增強(qiáng)，7個(gè)月達(dá)高峰，隨后逐漸下降。各組之間比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。
　　 結(jié)論：1.健側(cè)C7神經(jīng)移位術(shù)后，實(shí)驗(yàn)組大鼠前肢皮層代表區(qū)內(nèi)MAP-2、SYN呈“雙峰”表達(dá)；2.健側(cè)C7神經(jīng)移位術(shù)后，損傷對(duì)側(cè)半球發(fā)生功能重組，并通過增強(qiáng)的同側(cè)通路及新生的外周神經(jīng)