多梳基因Bmi-1在人乳腺癌轉(zhuǎn)移中的作用.pdf

1、中山大學(xué)碩士學(xué)位論文多梳基因B m i - 1 在人乳腺癌轉(zhuǎn)移中的作用T h e P o l y c o m b P r o t e i n B m i - 1 P l a y sa n I m p o r t a n t R o l e i nM e t a s t a s i so f H u m a n B r e a s t C a n c e r專 業(yè)：腫瘤學(xué)研究方向：腫瘤病因?qū)W學(xué)位申請人：馮艷導(dǎo)師：張玲副教授曾木圣教授宋立兵

2、副教授答辯委員會主席：答辯委員會委員：1 懸R e s e a r c hD e p a r t m e n t ，C a n c e r C e n t e r , S u n Y a t - s e n U n i v e r s i t y , S t a t eK e y L a b o r a t o r y o fO n c o l o g y i nS o u t h e r nC h i n a ，G u a n g z

3、 h o u ，G u a n g d o n g ，5 1 0 0 6 0 ，P ．R C h i n a ·中山大學(xué)2 0 0 4 級碩’仁學(xué)位論文 多梳基因砌，一1 在人乳腺癌轉(zhuǎn)移中的作用目的分析B m i - 1 在乳腺癌中的表達及其與臨床病理特征及預(yù)后的關(guān)系，探討B(tài) m i - 1 在乳腺癌轉(zhuǎn)移中的生物學(xué)功能及可能的分子機制。材料和方法l 、免疫組化：收集中山大學(xué)腫瘤醫(yī)院2 0 0 1 年2 月～2 0 0 1 年7

4、 月的乳腺癌標(biāo)本5 4 例。采用免疫組化( L S A B ) 的方法檢測5 4 例乳腺癌組織中B m i ．J 的表達，分析B m i - 1 在乳腺癌中的表達及其與病理特征的關(guān)系，采用K a p l a n ．M e i e r 法進行生存分析，采用C o x 比例風(fēng)險模型分析影響生存預(yù)后的因素。采用S P S S1 0 ．0f o rW i n d o w s 進行數(shù)據(jù)分析，P < O ．0 5 ( 雙側(cè)檢驗) 認為有統(tǒng)計學(xué)

5、意義。2 、細胞培養(yǎng)：建立B m i —J 穩(wěn)定高表達的細胞株7 6 N - t e W B m i - 1 和7 6 R ．3 0 砌扣J和B m i - 1 ．I 喇A i 穩(wěn)定起作用的M D A - M B - 4 3 5 S ／B m i - 1 ．R N A i 乳腺癌細胞株。3 、l i t ．P C R 和W e s t e r nb l o t ：在轉(zhuǎn)錄和翻譯水平檢測B m i - 1 及其一些侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)分子的表達。4

6、 、侵襲浸潤實驗：比較7 6 N ．t e r t ／B m i - 1 和7 6 R ．3 0 ／B m i - 1 與其對照組7 6 N - t e r t ／V e c t o r和7 6 R - 3 0 ／V c c t o r ， M D A ．M B - 4 3 5 S ／砌乒，．R N A i 和M D A ．M B - 4 3 5 S ／S c rc o n t r o lR N A i 在侵襲浸潤功能上的差異。5 、劃

7、痕損傷實驗：比較7 6 N ．t e r t ／B m i - I 和7 6 R ．3 0 ／B m i - I 與其對照組7 6 N - t e r t ／V e e t o r和7 6 R - 3 0 N e c t o r ，M D A ．M B - 4 3 5 S ／B m i - I ．R N A i 和M D A ．M B - 4 3 5 S ／S c rc o n t r o lR N A i 在動力學(xué)功能上的差異。6 、

8、生長曲線繪圖：比較M D A - M B - 4 3 5 S ／B m i - 1 一R N A i 和M D A —M B - 4 3 5 S ／S c r c o n t r o lR N A i 細胞在分裂增殖上的差異。7 、三維培養(yǎng)：比較7 6 N - t e r t l B m i - 1 和7 6 R ．3 0 ／B m i - 1 與其對照組7 6 N - t e r t ／V e e m r和7 6 R - 3 0 ／V

9、 e c t o r ，M D A ．M B - 4 3 5 S ／B m i - I ．R N A i 和M D A ．M B - 4 3 5 S ／S c rc o n t r o lR N A i 在模擬體內(nèi)環(huán)境下的生長方式和形態(tài)的差異。8 、軟瓊脂集落形成實驗：比較7 6 N - t e r t ／B m i - 1 和7 6 R ．3 0 ／B m i - I 與對照組7 6 N ．t e r t ／V e e t o r 和

10、 7 6 R ．3 0 ／V e c t o r ， M D A ．M B - 4 3 5 S ／B m 厶J ．R N A i 和M D A ·M B - 4 3 5 S ／S c r c o n t r o lR N A i 錨定非依賴性生長方式及集落形成能力的差異。9 、動物試驗：比較M D A ．M B - 4 3 5 S ／B m i - 1 ．R N A i 和M D A ．M B - 4 3 5 S ／S e r