DZNep對(duì)Molt-4細(xì)胞株MOB1A-B基因啟動(dòng)子區(qū)組蛋白H3K9甲基化及其對(duì)該基因表達(dá)水平的影響.pdf

1、目的:探討急性白血病患者M(jìn)OB1A/B基因的表達(dá)水平及其臨床意義,進(jìn)一步以白血病Molt-4細(xì)胞株為模型,探討組蛋白甲基化酶抑制劑3-Deazaneplanocin A(DZNep)對(duì)MOB1A/B基因啟動(dòng)子區(qū)組蛋白H3K9甲基化水平及基因表達(dá)水平的影響,為急性白血病的治療提供一個(gè)新的方向。
　　方法:應(yīng)用Real-timeq PCR及Western blot方法檢測(cè)MOB1基因在急性白血病患者與正常對(duì)照中的差異表達(dá);予DZNep

2、作用于Molt-4細(xì)胞后,采用CCK-8法觀察細(xì)胞的增殖情況、Annexin V FITC/PI流式細(xì)胞儀檢測(cè)凋亡率、Real-timeq PCR檢測(cè)MOB1A/B基因的表達(dá)情況、Western blot鑒定MOB1A/B蛋白的表達(dá)變化;BSP檢測(cè)MOB1A/B基因啟動(dòng)子區(qū)CpG島甲基化狀態(tài);采用染色質(zhì)免疫共沉淀技術(shù)檢測(cè)DZNep對(duì)白血病Molt-4細(xì)胞株MOB1A/B基因啟動(dòng)子區(qū)域組蛋白H3K9甲基化的影響。
　　結(jié)果:1、與正

3、常人對(duì)照組相比,MOB1A/B基因在急性淋巴細(xì)胞白血病患者中的表達(dá)量減少。
　　2、DZNep能夠明顯抑制Molt-4細(xì)胞株的增殖,并促進(jìn)其凋亡;DZNep作用于Molt-4細(xì)胞株后,MOB1B基因的表達(dá)有所增加,MOB1A基因的表達(dá)增加不明顯。
　　3、Molt-4細(xì)胞株中,MOB1A基因啟動(dòng)子區(qū)CpG島呈高甲基化狀態(tài),MOB1BCpG島的甲基化水平極其低下。
　　4、DZNep作用于Molt-4細(xì)胞株后,MOB1A

4、/B基因啟動(dòng)子區(qū)域組蛋白H3K9甲基化水平明顯降低(單甲基化、雙甲基化、三甲基化水平均呈現(xiàn)不同程度的下降)。
　　結(jié)論:Hippo信號(hào)通路核心成員MOB1A/B基因在急性白血病患者的白血病細(xì)胞中存在著低表達(dá)的現(xiàn)象,與其啟動(dòng)子區(qū)組蛋白H3K9甲基化修飾和/或CpG島的高甲基化修飾密切相關(guān);組蛋白甲基化酶抑制劑DZNep能夠逆轉(zhuǎn)該基因啟動(dòng)子區(qū)組蛋白H3K9的甲基化修飾水平,逆轉(zhuǎn)MOB1B基因的表達(dá),同時(shí)明顯抑制Molt-4細(xì)胞株的增殖