陽明腑實證大鼠模型的制備及其病理機制研究.pdf

1、《傷寒論》是中醫(yī)學的經(jīng)典論著，其對臨床辨證用藥具有重大的指導作用。陽明腑實證是許多外感熱病病程中所出現(xiàn)的邪熱內熾、又伴有腹部實證癥狀的一組全身性綜合證候。它以痞、滿、躁、實、堅為主癥，可以出現(xiàn)在許多疾病過程中，例如：嚴重腹內感染、重型急腹癥、嚴重創(chuàng)傷、大面積燒傷、大手術后等。具有發(fā)病急、病情重、變化快、并發(fā)癥多的特點，如不及時診治?？梢鹦菘?、DIC、ARDS甚至多器官功能衰竭（MODS）從而危及生命。但其辨證缺乏客觀性，療效缺乏客觀評

2、價指標，因此，在進行文獻整理與臨床驗證等研究的同時，吸收現(xiàn)代科學知識的方法，加強實驗研究是十分必要的。在醫(yī)學研究中，建立疾病的動物模型是一個重要的手段。在陽明腑實證的研究中，復制動物模型的方法也是必不可少的。特別是近年來，建立大鼠陽明腑實證動物模型是當務之急。有了合適的動物模型，才能建立進一步進行中西醫(yī)結合診治的平臺。 目的：采用灌服熱性中藥與自身糞便相結合的方法制備大鼠陽明腑實證模型，并與已得到廣泛認可的兩種模型（盲腸結扎穿孔

3、法、腹腔注射酵母多糖與液體石蠟法）對大鼠血漿ET、腫瘤壞死因子（TNF-α）、IL-10含量進行定量測定。用間苯三酚法檢測各組大鼠小腸對D-木糖的吸收功能，并觀察肺、小腸、肝、腎組織的病理形態(tài)學變化。 方法：SD大鼠40只，雌雄各半，體重180～220g。將實驗大鼠隨機分成4組，每組10只。對照組、灌服熱性中藥與自身糞便組（簡稱中藥組）、盲腸結扎穿孔組（簡稱結扎組）、腹腔注射ZymosanA與無菌液體石蠟混懸液組（簡稱注射組）。

4、中藥組：以附子、吳茱萸、干姜以1：1：1作水煎劑，20g/kg灌服12天后，禁食，100g/L自身糞便混懸液2ml灌胃，每天2次，連續(xù)2天，同時5%乙醇代水隨意飲用，每日更換，保證濃度。結扎組：實驗動物正常飼養(yǎng)，每天灌服自來水20g/kg體重，連續(xù)14天。第15日以10%水合氯醛腹腔注射麻醉后，取右下腹斜切口入腹，結扎盲腸根部，于距結扎線約0．5cm處以Sml注射器針頭穿孔并縫合切口，24h后取材。其他組僅開腹游離盲腸不做結扎穿孔后縫合

5、切口。注射組：實驗動物正常飼養(yǎng)，每天灌服自來水20g/kg體重，連續(xù)14天。第15日以無菌ZymosanA粉劑與無菌液體石蠟制成混懸液，按1．0mg/g體重腹腔注射，24小時后取材，其他各組注射等量無菌液體石蠟。血漿D-木糖測定（間苯三酚法）：各組大鼠于處死前一小時先灌服50g/ID-木糖溶液0．3g/kg，1h后腹主動脈取血，制備血漿，用間苯三酚法進行檢測。血漿ET、腫瘤壞死因子（TNF-α）、IL-10均采用ELISA法檢測，下腔靜

6、脈取血，制備血漿嚴格按試劑盒說明操作。處死大鼠后，取出肝、肺、腎、小腸，用生理鹽水沖洗干凈，制作病理切片，HE染色，光鏡觀察。 結果： 1．一般狀況：中藥組大鼠灌服熱性中藥3天后出現(xiàn)體重降低，豎毛，活動增加，飲水量增加，尿量減少并發(fā)黃；灌自身糞便當天出現(xiàn)排便時間延長，排便粒數(shù)減少，大便干結，并成圓珠狀或串珠狀；其他組大鼠第15日前飲食，大便正常，毛發(fā)有色澤、行為狀態(tài)正常。 2．血漿ET含量：與對照組相比較，三個模

7、型組的血漿ET含量均明顯升高，差異具有顯著性（P<0．05），三個模型組之間差異沒有顯著性（P>0．05）。 3．血漿TNF-α含量：與對照組相比較，三個模型組的血漿TNF-α含量均明顯升高，差異具有顯著性（P<0．05），三個模型組之間差異沒有顯著性（P>0．05）。 4．血漿IL-10含量：與對照組相比較，三個模型組的血漿IL-10含量均明顯升高，差異具有顯著性（P<0．05），三個模型組之間差異沒有顯著性（P>0．

8、05）。 5．D-木糖吸收率：與對照組相比較，三個模型組的血漿D-木糖含量均明顯升高，差異具有顯著性（P<0．05），三個模型組之間差異沒有顯著性（P>0．05）。 6．各組大鼠組織病理形態(tài)學變化：三個模型組大鼠的主要臟器（小腸、肝、肺、腎）均表現(xiàn)為明顯的炎性病理改變。 結論： 1．灌服熱性中藥與自身糞便法在各個檢測指標上均達到以上提及的兩種造模方法的檢測結果，其造模原理更加符合中醫(yī)理論。 2．血