大承氣湯修復(fù)陽(yáng)明腑實(shí)證大鼠腸神經(jīng)-ICC-DMP間信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路損傷實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、背景:陽(yáng)明腑實(shí)證是指在外感熱病病程中所出現(xiàn)的邪熱內(nèi)熾，又伴有腹部實(shí)證癥狀的一組全身性綜合證候。陽(yáng)明腑實(shí)證患者臨床上均有不同程度的腹部脹滿、疼痛、大便秘結(jié)等胃腸運(yùn)動(dòng)功能障礙表現(xiàn)。胃腸道功能的好壞已成為判斷危重病人預(yù)后的一項(xiàng)重要指標(biāo)。近來(lái)研究已證實(shí)胃腸Cajal間質(zhì)細(xì)胞(interstitial cells of Cajal，ICC)是一種與神經(jīng)和平滑肌細(xì)胞密切相關(guān)的間質(zhì)細(xì)胞，廣泛存在于胃腸組織中，在胃腸運(yùn)動(dòng)調(diào)控中起重要作用。胃腸神經(jīng)—IC

2、C—平滑肌網(wǎng)絡(luò)作為胃腸動(dòng)力的基本功能單位，腸神經(jīng)—ICC-DMP間信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和胃腸運(yùn)動(dòng)功能密切相關(guān)。目的:以陽(yáng)明腑實(shí)證大鼠為研究對(duì)象，觀察腸神經(jīng)-深肌叢ICC(ICC-DMP)間信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的表達(dá)變化以及大承氣湯治療作用。探討陽(yáng)明腑實(shí)證致胃腸運(yùn)動(dòng)障礙的本質(zhì)和大承氣湯(DCQD)治療陽(yáng)明腑實(shí)證機(jī)理。
　　 方法:健康成年Wistar大鼠100只，雌雄各半，體重200g-250g，隨機(jī)分為對(duì)照組（20只）、陽(yáng)明腑實(shí)證組（40只）和DC

3、QD治療組（40只）。對(duì)照組動(dòng)物腹腔注射1.0ml生理鹽水。陽(yáng)明腑實(shí)證組灌服熱性中藥、自身糞便灌胃，然后腹腔注射1.0mlE.coloi.混懸液建立陽(yáng)明腑實(shí)證模型。治療組于造模成功后即給予大承氣湯灌胃，2次/日，每次1.0ml/100g，連用5日。取各組存活大鼠上段小腸組織制作小腸全厚肌層組織標(biāo)本及石蠟切片。進(jìn)行c-Kit抗體和PKA、PKC、caveolin-1抗體免疫熒光雙標(biāo)記染色后，激光掃描共聚焦顯微鏡及免疫組化檢測(cè)、分析。

4、>　　 結(jié)果:大體標(biāo)本:陽(yáng)明腑實(shí)證組大鼠較對(duì)照組胃腸極度擴(kuò)張，腸梗阻征象明顯;DCQD治療組大鼠胃腸擴(kuò)張、梗阻較陽(yáng)明腑實(shí)證組明顯減輕。
　　 激光掃描熒光共聚焦顯微鏡檢測(cè):與對(duì)照組相比，陽(yáng)明腑實(shí)證組小腸ICC-DMP數(shù)量明顯減少（P＜0.01），細(xì)胞熒光IOD值明顯減弱（P＜0.01），網(wǎng)絡(luò)樣結(jié)構(gòu)受到明顯的破壞;陽(yáng)明腑實(shí)證組小腸PKA、PKC、caveolin-1熒光IOD值較對(duì)照組明顯減弱(P＜0.01)。與陽(yáng)明腑實(shí)證組相比

5、，DCQD治療組小腸ICC-DMP數(shù)量明顯增多（P＜0.01），細(xì)胞熒光IOD值明顯增強(qiáng)（P＜0.01），基本保持完整的網(wǎng)絡(luò)狀結(jié)構(gòu);小腸PKA、PKC、caveolin-1熒光IOD值較陽(yáng)明腑實(shí)證組明顯增強(qiáng)（P＜0.01）。
　　 免疫組化學(xué)檢測(cè):與對(duì)照組相比，陽(yáng)明腑實(shí)證組小腸ICC表達(dá)量明顯減小(P＜0.01)，呈散在分布，條帶樣結(jié)構(gòu)的連續(xù)性受到破壞。PKA、PKC、caveolin-1蛋白表達(dá)較對(duì)照組明顯減小(P＜0.01)

6、。與陽(yáng)明腑實(shí)證組相比，DCQD治療組小腸ICC表達(dá)量明顯增加(P＜0.01)，條帶樣結(jié)構(gòu)基本保持完整。PKA、PKC、caveolin-1蛋白表達(dá)較陽(yáng)明腑實(shí)證組明顯增加（P＜0.01）。
　　 結(jié)論:陽(yáng)明腑實(shí)證大鼠胃腸擴(kuò)張，梗阻征象明顯;DCQD能夠顯著改善其胃腸道梗阻癥狀。陽(yáng)明腑實(shí)證時(shí)，小腸ICC-DMP數(shù)量減少，網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)受到破壞;腸神經(jīng)—ICC-DMP間信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路受到損傷。DCQD可以減輕陽(yáng)明腑實(shí)證時(shí)ICC-DMP受到的損