聯(lián)苯雙酯納米脂質(zhì)載體給藥系統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、研究制備一種新型的藥物載體-納米脂質(zhì)載體(NLC)，以聯(lián)苯雙酯為模型藥物，以期提高藥物的包封率、載藥量，改變其體內(nèi)分布。
　　 本課題采用現(xiàn)代靶向制劑技術(shù)，以聯(lián)苯雙酯(Bifendate，DDB)為模型藥物，以具有良好生物相容性和生物可降解性的單硬脂酸甘油酯、硬脂酸和中鏈脂肪酸甘油酯混合脂質(zhì)為載體材料，采用乳化蒸發(fā)一低溫固化法制備聯(lián)苯雙酯納米脂質(zhì)載體（Bifendate-loaded nanostructured lipid c

2、arriers，DDB-NLC）。實(shí)驗(yàn)以包封率為主要考察指標(biāo)，通過(guò)均勻設(shè)計(jì)法對(duì)處方工藝進(jìn)行優(yōu)化，確定最佳處方工藝，并系統(tǒng)的研究了DDB-NLC凍干粉針劑的制備、處方和工藝，考察了制劑的體外釋放特點(diǎn)以及體內(nèi)分布、藥動(dòng)學(xué)和體外藥效學(xué)特征，以期通過(guò)肝靶向分布達(dá)到提高DDB治療肝臟疾病的效果，降低其毒副作用的目的。
　　 通過(guò)均勻設(shè)計(jì)優(yōu)化的最佳處方工藝為藥脂比為3:20，液態(tài)脂質(zhì)／固態(tài)脂質(zhì)比為1:5，表面活性劑用量為450mg，攪拌速度

3、800rmp，乳化溫度為75℃。優(yōu)化工藝操作簡(jiǎn)單，所制備的DDB-NLC包封率穩(wěn)定，平均包封率(91.52±1.76)％，載藥量為(12.07±0.17)％。透射電鏡下觀察所得納米粒為類球形，納米粒彼此不粘連，粒徑分布的范圍較窄，平均粒徑為277.0nm，Zeta電位為-21.91mV，pH值為5.95左右。
　　 為提高所制備DDB-NLC的儲(chǔ)存穩(wěn)定性，本文進(jìn)一步對(duì)所制得的DDB-NLC進(jìn)行了凍干處理，以外觀、色澤、再分散性為

4、評(píng)價(jià)指標(biāo)，將DDB-NLC混懸液制成凍干粉針劑，確定其凍干工藝為：在優(yōu)化工藝下制備的聯(lián)苯雙酯納米脂質(zhì)載體中加入5％甘露醇作為支架劑，振搖使溶解，分裝于10ml西林瓶中，置-80℃的超低溫冰箱中冷凍24h，取出，然后迅速移入冷凍干燥機(jī)中，-40℃、0.10mbar條件下凍干48h，即可得DDB-NLC的凍干品。質(zhì)量評(píng)價(jià)結(jié)果表明凍干過(guò)程對(duì)藥物的粒徑、包封率、載藥量及Zeta電位影響較小。對(duì)凍干品的DSC和X-射線衍射分析結(jié)果表明，制成納米粒

5、后藥物已被載體包裹或吸附，不再是單純的混合，藥物不再以晶體結(jié)構(gòu)存在，即DDB-NLC中形成了新的物相。用透析袋法對(duì)DDB-NLC凍干粉針劑的體外釋藥特性進(jìn)行了研究，結(jié)果表明DDB-NLC的體外釋藥具有緩釋制劑特征，可用一級(jí)動(dòng)力學(xué)方程擬合，方程為L(zhǎng)n(100-Q)=-0.1951t+4.6128,r=0.9985。
　　 以DDB-NLC的外觀、再分散性、含量和包封率等為指標(biāo)，評(píng)價(jià)了DDB-NLC凍干針劑的初步穩(wěn)定性，結(jié)果顯示DD

6、B-NLC凍干粉在室溫（25℃左右）、冷藏條件（4℃左右）條件下放置三個(gè)月，其物理化學(xué)穩(wěn)定性良好。
　　 本文采用HPLC法，分別測(cè)定了小鼠尾靜脈注射DDB-Sol和DDB-NLC后在體內(nèi)的組織分布情況，結(jié)果表明聯(lián)苯雙酯納米脂質(zhì)載體能夠使DDB靶向濃集于吞噬細(xì)胞豐富的肝中，并明顯延長(zhǎng)DDB在肝中的作用時(shí)間，從而有利于提高DDB的治療效果，具有重要臨床意義。
　　 在藥物動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)中，結(jié)果表明DDB-Sol與DDB-NLC

7、的血藥濃度-時(shí)間曲線有顯著不同。以三室模型描述藥物在體內(nèi)的動(dòng)態(tài)過(guò)程最合適，靜脈注射DDB-Sol后，小鼠體內(nèi)藥物動(dòng)力學(xué)方程為：C=0.79e-0.12t+142.6e-20.19t+0.164e-0.87t，主要藥動(dòng)學(xué)參數(shù)為T1/2α=0.034h，T1/2β=0.793h，MRT=1.573h，清除率CLs=5.344mg/kg/h／(μg/ml)，AUC為4.678h·μg/ml，而靜脈注射DDB-NLC凍干粉針劑后，小鼠體內(nèi)藥物動(dòng)

8、力學(xué)有明顯改變，其藥物動(dòng)力學(xué)方程為：C=0.007e-0.099t+9.91e-7.66t+0.178e-0.10t，T1/2α、T1/2β均顯著延長(zhǎng)，分別為T1/2α=0.09h，T1/2β=6.846h，MRT增加為4.114h，清除率降低，CLs=2.836mg/kg/h/(μg/ml)，AUC則增至9.109h·μg/ml。分析結(jié)果可知，DDB-NLC能夠顯著延長(zhǎng)DDB在小鼠體內(nèi)的半衰期和體內(nèi)滯留時(shí)間，AUC顯著增高，清除率明顯

9、降低，說(shuō)明將DDB制成DDB-NLC后，有助于提高藥物的生物利用度，并發(fā)揮長(zhǎng)效作用。
　　 以CCl4損傷人肝細(xì)胞為模型，采用MTT法對(duì)細(xì)胞活性和增殖進(jìn)行檢測(cè)，研究聯(lián)苯雙酯不同濃度對(duì)抗肝損傷的作用。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，聯(lián)苯雙酯納米脂質(zhì)載體能夠增強(qiáng)CCl4肝損傷模型肝細(xì)胞的增殖能力。
　　 以聯(lián)苯雙酯為模型藥物制備納米脂質(zhì)載體的研究目前國(guó)內(nèi)外尚未見(jiàn)報(bào)道，本文的研究成果為難溶性藥物注射劑的開發(fā)提供了思路，并對(duì)治療肝病藥物聯(lián)苯雙酯注射劑