納米載體輸送小干擾RNA克服系統(tǒng)給藥屏障.pdf

1、借助納米顆粒特殊的物理化學(xué)性質(zhì)，我們可以實(shí)現(xiàn)對(duì)藥物的荷載、保護(hù)、緩釋等作用，或者利用其尺度效應(yīng)、靶向修飾以及對(duì)病灶微環(huán)境的響應(yīng)能力可顯著增強(qiáng)藥物在靶部位的富集，降低藥物副作用。siRNA可以高效性和特異性地沉默靶基因的表達(dá)，因此在疾病治療方面具有很大應(yīng)用潛力，有可能成為一種新型藥物。但是，由于靜脈注射siRNA在血清中非常不穩(wěn)定、較難進(jìn)入細(xì)胞，并且不具備組織和細(xì)胞的靶向能力，使得其在疾病治療方面的應(yīng)用受到了很大的阻礙。因此，開(kāi)發(fā)高效、安

2、全、具備特異性靶向能力的納米載體用于siRNA輸送是非常必要的。隨著相關(guān)研究的深入，人們?cè)絹?lái)越清楚地認(rèn)識(shí)到siRNA納米輸送載體需要具備以下性能:完成血液長(zhǎng)循環(huán)、成功在腫瘤富集、促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)化以及逃逸內(nèi)涵體的能力。本課題針對(duì)siRNA靜脈給藥關(guān)鍵屏障，構(gòu)建了不同的siRNA靜脈給藥納米載體，通過(guò)體外和體內(nèi)的實(shí)驗(yàn)來(lái)評(píng)價(jià)這些納米載體輸送siRNA克服靜脈給藥屏障的性能，以及輸送siRNA用于肝臟基因沉默和腫瘤治療。研究分為兩個(gè)部分:
　

3、　第一部分:我們構(gòu)建了一種由兩種兩親性嵌段共聚物組裝而成的混合膠束納米顆粒，通過(guò)調(diào)整顆粒組成中兩種聚合物的比例，便捷地實(shí)現(xiàn)了對(duì)顆粒粒徑、電勢(shì)和PEG比例等性質(zhì)的調(diào)控;進(jìn)一步發(fā)展了一種乙酰半乳糖修飾的肝靶向混合膠束納米體系，在體外水平及體內(nèi)水平證實(shí)了其靶向基團(tuán)的修飾可以顯著增加siRNA進(jìn)入肝組織肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞的能力，并成功下調(diào)肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞中的靶基因的表達(dá)，具備良好的肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞靶向能力。
　　第二部分:我們?cè)O(shè)計(jì)了對(duì)腫瘤自身微環(huán)境響應(yīng)的“脫

4、殼”納米膠束(MSNP)用作siRNA輸送載體。通過(guò)體外水平和體內(nèi)水平實(shí)驗(yàn)，我們細(xì)致地觀察了該載體在系統(tǒng)給藥屏障中的表現(xiàn):該載體對(duì)腫瘤特異性高表達(dá)的基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP-2)具有高度敏感性，在該酶的幫助下可以實(shí)現(xiàn)“脫去”P(pán)EG外殼，同時(shí)暴露出具有細(xì)胞膜穿透功能的九聚精氨酸;該載體使得siRNA在血液環(huán)境中具有長(zhǎng)循環(huán)能力，到達(dá)腫瘤后，由于MMP-2的存在，該載體增加siRNA在腫瘤的富集，顯著增加siRNA被腫瘤細(xì)胞的攝取;最終使用該