我國產(chǎn)意大利蜂蜂毒多肽的分離純化、結構鑒定、活性測定以及固相合成研究.pdf

1、蜂毒毒素是我國傳統(tǒng)中藥的寶貴資源，中醫(yī)認為它具有祛風、止痛、平喘的功效，可用于治療風濕、類風濕性關節(jié)炎，神經(jīng)炎，皮膚病等疾病。近年來，還有蜂毒制劑用于治療老年癡呆及抗抑郁的專利報道。
　　 現(xiàn)已證明，蜂毒具有多種藥理活性:在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中有抗膽堿活性，鎮(zhèn)靜和鎮(zhèn)痛作用;在呼吸及心血管系統(tǒng)中可產(chǎn)生呼吸加快、擴張血管、降低血壓、抗心律失常、改善冠狀動脈供血和微循環(huán)的作用;還具有抗炎、抗菌、溶血、抗凝血、抗病毒以及防輻射等作用。蜂毒毒素

2、已經(jīng)被證明是多種離子通道的配體，是闡明多種離子通道的結構和功能的有力工具。
　　 目前，蜂毒多肽組分在我國已經(jīng)成為上市藥物，用于治療風濕類疾病和周圍神經(jīng)炎。
　　 為研究考察我國產(chǎn)意大利蜂(Apis mellifera)蜂毒成分、尋找新型的離子通道配體以及高效低毒的活性多肽，本文對蜂毒毒素的化學成分進行了研究，并初步測定部分多肽對鈉和鉀電流的影響。
　　 1.綜合運用多種色譜技術，從我國產(chǎn)意大利蜜蜂(Apis m

3、ellifera)蜂毒中共分離得到10個蜂毒毒素，通過FTICR等質譜、氨基酸分析、Edman降解等方法確定了這些蜂毒毒素的一級結構，其中3個為新的蜂毒毒素，分別命名為melittin F1，secapin-1和secapin-2。secapin-1、secapin-2與已知多肽secapin的區(qū)別主要集中在第4位，第16位及第19位氨基酸殘基上。
　　 2.另有5個蜂毒毒素通過測定LC-ESI-Q-TOF的二級質譜數(shù)據(jù)并結合數(shù)

4、據(jù)庫檢索得到鑒定，分別命名為melittin F2，melittin F3，melittin F4，melittin及melittin-G，其中melittin為已知多肽，其它4個多肽尚無天然存在的報道。
　　 3.應用HPLC/FTICR-MS分析技術，建立了蜂毒的多肽指紋圖譜。并對其中多肽的分子量進行了歸屬。結果表明此種蜂毒中多為小分子量多肽，分子量范圍主要在1000-3500之間。能檢測到的分子量大于5000的多肽數(shù)量較少