耐藥腫瘤細(xì)胞株KBv-,200-GCS基因表達(dá)與MDR關(guān)系的研究.pdf

1、背景:化學(xué)治療在腫瘤綜合治療中的地位和作用日益重要,近年來,新的細(xì)胞毒性藥物的發(fā)展使許多腫瘤治療效果有了明顯改觀.盡管如此,腫瘤細(xì)胞對多種化療藥物產(chǎn)生交叉耐藥性,仍是造成化療失敗的主要原因,90％以上的腫瘤患者死因或多或少都與耐藥有關(guān).研究腫瘤的多藥耐藥性及其臨床逆轉(zhuǎn)已成為腫瘤治療亟待解決的問題,亦是目前腫瘤研究的難點(diǎn)及熱點(diǎn)領(lǐng)域.近年來國內(nèi)腫瘤多藥耐藥的研究多集中在基因及蛋白質(zhì)水平上,對鞘糖脂的研究較少.我們前期的研究工作發(fā)現(xiàn),耐藥細(xì)胞

2、KBv<,200>質(zhì)膜上糖脂抗原CMH(包括葡萄糖神經(jīng)酰胺和半乳糖神經(jīng)酰胺)表達(dá)增強(qiáng),說明CMH可能在腫瘤多藥耐藥形成過程中起著非常重要的作用.因此我們從基因水平上分析腫瘤細(xì)胞合成CMH限速酶(葡萄糖神經(jīng)酰胺合成酶GCS)基因表達(dá)與MDR的關(guān)系,以進(jìn)一步探討腫瘤MDR新機(jī)制,為尋找逆轉(zhuǎn)腫瘤耐藥方法提供新的研究途徑.目的:觀察人口腔表皮樣癌多藥耐藥細(xì)胞株KBv<,200>葡萄糖神經(jīng)酰胺合酶(glucosylceramide synthas

3、e,GCS)基因表達(dá)與多藥耐藥性的關(guān)系.方法:首先采用RT-PCR分析KBv200及其親本KB細(xì)胞株GCS基因表達(dá)的差異,運(yùn)用MTT法分析KBv<,200>細(xì)胞株經(jīng)糖脂合成酶抑制劑苯基棕櫚酰胺嗎啡丙醇(DL-PPMP)及鈣離子通道阻滯劑異搏定處理前后腫瘤細(xì)胞多藥耐藥性的變化,同時(shí)應(yīng)用RT-PCR技術(shù)研究KBv<,200>細(xì)胞耐藥逆轉(zhuǎn)后GCS及mdr1基因的表達(dá).結(jié)論:KBv<,200>GCS基因的表達(dá)與MDR存在正相關(guān),GCS基因在腫瘤