基于MAPK途徑的RON介導(dǎo)的MDCK細(xì)胞上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化的機制研究.pdf

1、目的：EMT是許多腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移早期的一個重要過程,RON蛋白也可能同時參與其中。在本研究中,我們通過Western blotting和細(xì)胞劃痕遷移試驗分析了RON在MDCK細(xì)胞EMT過程中的作用和機制。
　　方法：2nM MSP刺激72h后,比較經(jīng)RON-cDNA轉(zhuǎn)染的MDCK細(xì)胞和正常MDCK細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變,采用劃痕試驗分析經(jīng)MSP刺激的細(xì)胞遷移能力改變,Western Blotting分析經(jīng)RON-cDNA轉(zhuǎn)染后細(xì)胞的E-c

2、adherin、Vimentin、Snail、Twist等表型相關(guān)蛋白改變及Erk1/2、GSK-3β等相關(guān)信號分子改變。并分析上述改變能否被信號通路相關(guān)抑制劑逆轉(zhuǎn)。
　　結(jié)果：1.巨噬細(xì)胞刺激蛋白(MSP)刺激后,經(jīng)MDCK細(xì)胞轉(zhuǎn)染RON-cDNA而得的RE7細(xì)胞逐個分散。2.由MDCK細(xì)胞轉(zhuǎn)染wt-RON來源的RE7細(xì)胞與MDCK細(xì)胞相比,不表達E-cadherin而表達vimentin及Snail表達增加。3. RE7細(xì)胞經(jīng)