黃曲霉毒素B1對凡納濱對蝦抗氧化系統(tǒng)和DNA損傷的研究.pdf

1、本研究通過體內(nèi)實(shí)驗(yàn)和體外培養(yǎng)兩種方式探討高濃度黃曲霉毒素B1(AFB1)對凡納濱對蝦（Litopenaeus vannamei）肝胰腺細(xì)胞和DNA的損傷機(jī)制。
　　主要研究方法與具體結(jié)果如下:
　　1、體內(nèi)實(shí)驗(yàn)采用兩種飼料（對照組飼料和含2000μg/kgAFB1的實(shí)驗(yàn)組飼料）飼喂體質(zhì)量為（0.3±0.02）g F1代凡納濱對蝦4周。每4d進(jìn)行一次肝胰腺抗氧化酶的測定。結(jié)果顯示，實(shí)驗(yàn)組第8 d SOD活力顯著低于對照組。在連

2、續(xù)飼喂兩周后SOD活力顯著降低，同時(shí)實(shí)驗(yàn)組SOD活力極顯著低于對照組。CAT活力在每個(gè)階段均顯著下降，20 d后雖然有上升趨勢，但活力明顯低于初始值，8d后，實(shí)驗(yàn)組CAT活力均低于對照組，尤其是第8、16和24 d酶活力極顯著低于對照組。GSH-Px活力整體均低于對照組，且機(jī)體自我修復(fù)能力下降。MDA含量在16d之后顯著增加，同時(shí)實(shí)驗(yàn)組MDA含量極顯著高于對照組，且呈現(xiàn)上升的趨勢。這些結(jié)果表明，高濃度AFB1對凡納濱對蝦抗氧化酶的損傷因

3、酶種類而異，同時(shí)對肝胰腺的損傷持續(xù)增加，在4周內(nèi)便會造成肝胰腺的嚴(yán)重?fù)p傷。同時(shí)，養(yǎng)殖結(jié)束后，通過單細(xì)胞凝膠電泳實(shí)驗(yàn)(SCGE)對肝胰腺細(xì)胞DNA損傷進(jìn)行檢測，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明高濃度黃曲霉毒素B1對肝胰腺細(xì)胞DNA存在顯著的損傷作用。
　　2、將體外培養(yǎng)的培養(yǎng)液中AFB1的終濃度設(shè)置為0，400，800，1200，1600μg/L，對原代培養(yǎng)的肝胰腺細(xì)胞處理1h后進(jìn)行部分抗氧化酶的測定。實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)SOD酶活力隨濃度升高呈現(xiàn)先增加后減少

4、的趨勢，肝胰腺細(xì)胞的T-AOC隨AFB1濃度的增加而下降。GSH-Px酶活力受AFB1濃度影響較大，400μg/L的濃度便會造成酶活力的顯著下降。肝胰腺細(xì)胞內(nèi)MDA含量有明顯的增加。結(jié)果表明AFB1能在體外條件下?lián)p傷肝胰腺細(xì)胞的抗氧化系統(tǒng)。
　　3、將體外培養(yǎng)的培養(yǎng)液中AFB1的終濃度設(shè)置為2000μg/L，將染毒時(shí)間設(shè)為0.5，1，1.5，2，2.5 h，分別進(jìn)行抗氧化酶的測定。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)組SOD酶活力隨時(shí)間出現(xiàn)先短暫升高