Nestin調(diào)控多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞生物學(xué)行為的研究.pdf

1、多發(fā)性骨髓瘤是B細(xì)胞起源的、以骨髓克隆性漿細(xì)胞惡性增生和異常積累，并伴單克隆性免疫球蛋白增多為特征的一種衰竭性、不可治愈的惡性疾病。骨髓中惡性漿細(xì)胞的克隆性增殖和轉(zhuǎn)移、血漿和/或尿中出現(xiàn)單克隆蛋白及器官功能障礙是本病的主要特點(diǎn)。該病目前尚不能被徹底治愈，中位生存期大約為3～4年，是導(dǎo)致患者死亡的嚴(yán)重疾病之一，因此，能夠抑制甚至逆轉(zhuǎn)多發(fā)性骨髓瘤進(jìn)展是醫(yī)學(xué)研究的重要目標(biāo)。
　　巢蛋白(nestin)是最晚被識(shí)別的最大中間絲蛋白，其聚合

2、、解聚不僅能直接影響細(xì)胞內(nèi)部的信號(hào)傳導(dǎo)，而且參與細(xì)胞周期中的如增殖、分化、遷移等重要過程。研究人員在對(duì)實(shí)體瘤的研究中發(fā)現(xiàn):nestin在腫瘤的發(fā)病也起到了至關(guān)重要的作用，能夠提示腫瘤的惡性程度，并可以作為腫瘤的診斷、預(yù)后的因素。令人意外的是，在多發(fā)性骨髓瘤患者體內(nèi)成熟的漿CD138+CD38+細(xì)胞以及多種多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞系中，nestin亦有明顯的表達(dá)趨勢(shì)，但是nestin在多發(fā)性骨髓瘤中的作用并未得到系統(tǒng)的、科學(xué)的研究。目前，僅有研究

3、者推測(cè)在多發(fā)性骨髓瘤中的漿細(xì)胞的髓外遷移過程中，nestin可能發(fā)揮了類似的其在實(shí)體瘤中的功能，或在多發(fā)性骨髓瘤的惡性漿細(xì)胞的異常蛋白的非正常增生過程中起到特定的作用。
　　如上所述，我們?cè)谶@些已有研究的基礎(chǔ)上，通過干預(yù)nestin的表達(dá)來初步探討其對(duì)多發(fā)性骨髓瘤生物學(xué)行為的影響，以便為治療多發(fā)性骨髓瘤探索新的標(biāo)靶。
　　目的：
　　探討nestin對(duì)多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞增殖、分化、侵襲及凋亡的生物學(xué)行為的影響，評(píng)價(jià)nes

4、tin的表達(dá)在多發(fā)性骨髓瘤中所起到的生物學(xué)作用，推斷其對(duì)多發(fā)性骨髓瘤疾病發(fā)生、發(fā)展的生物學(xué)意義。
　　方法：
　　培養(yǎng)已被證實(shí)有nestin表達(dá)的多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞系U266，以nestin-siRNA轉(zhuǎn)染的方式抑制其nestin表達(dá)。轉(zhuǎn)染模型構(gòu)建成功后，分別以MTS法，腫瘤細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)及流式細(xì)胞分析等方法檢定并比較基因沉默前后多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞的增殖、侵襲、周期及凋亡情況。
　　結(jié)果：
　　在nestin基因沉默后

5、，與空白對(duì)照組相比，多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞系細(xì)胞的增殖和侵襲水平有著明顯的下降(94.82％±1.70％vs74.55％±2.19％，P＜0.05;376.33±44.38vs105.67±18.15，P＜0.05);凋亡率上升(11.46％±1.09％vs37.98％±4.28％，P＜0.05)。細(xì)胞周期較多的停滯于G2/M期(21.06％±1.86％vs54.83％±7.56％，P＜0.05)，同時(shí)細(xì)胞凋亡的比率明顯升高(11.65％±2