2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、鋅離子是人體必需微量元素之一,參與調(diào)節(jié)多種酶類的活性,在神經(jīng)傳導(dǎo)中具有重要作用。有文獻(xiàn)報道在缺血性腦損傷中,鋅離子在大腦皮質(zhì)、丘腦、紋狀體、杏仁核,特別是海馬門區(qū)和CA1區(qū)聚集,螯合鋅離子可阻止神經(jīng)元退變的發(fā)生。另有報道,細(xì)胞周期素依賴性蛋白激酶5(CDK5)通過磷酸化NMDA受體介導(dǎo)了海馬CA1區(qū)神經(jīng)元缺血性損傷。然而鋅離子是否是通過調(diào)節(jié)CDK5的活性促進(jìn)神經(jīng)元的損傷,目前尚無報道,其內(nèi)在調(diào)節(jié)機(jī)制有待研究證實(shí)。
  目的:探討鋅

2、離子對細(xì)胞周期蛋白依賴性蛋白激酶5的調(diào)節(jié)及其在缺血性腦損傷中的作用。
  材料和方法:
  1.建立大鼠大腦中動脈栓塞(Middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,選用Sprague Dawley(SD)大鼠,進(jìn)行單側(cè)大腦中動脈栓塞術(shù)。實(shí)驗(yàn)分為三組:假手術(shù)組(Sham)組、大腦中動脈栓塞組(MCAO)組和腹腔注射鋅離子螯合劑Clioquinol(CQ)+MCAO組,每組12只。單側(cè)大腦中

3、動脈缺血1小時再灌注6小時后取材,取新鮮大腦速凍后切片,進(jìn)行TTC染色,整體觀察腦組織損傷面積。采用4%的多聚甲醛灌流固定及后固定,脫水后冰凍切片,尼氏染色觀察神經(jīng)元數(shù)目。用免疫印跡法和免疫沉淀法檢測相關(guān)蛋白水平及活性。
  2.培養(yǎng)小鼠成神經(jīng)瘤N2a細(xì)胞,分為對照(Control)組和鋅處理(ZnSO4)組,無血清孵育3小時。收集蛋白,用免疫印跡法和免疫沉淀法檢測相關(guān)蛋白的表達(dá)和活性變化。
  結(jié)果:在大腦中動脈栓塞模型中

4、,MCAO組較Sham組海馬區(qū)域神經(jīng)元存活數(shù)目明顯減少,CDK5的活性明顯增加,伴隨Y15位點(diǎn)磷酸化水平增高。鋅離子螯合劑CQ腹腔注射可明顯逆轉(zhuǎn)神經(jīng)元的死亡、CDK5的活化及Y15位點(diǎn)磷酸化。在細(xì)胞水平,鋅離子孵育可顯著增加CDK5-Y15位點(diǎn)的磷酸化水平及活性,鋅離子對CDK5無直接活化作用,但能夠抑制鈣蛋白酶Calpain的活性。
  結(jié)論:在缺血性腦損傷中,鋅離子通過磷酸化CDK5酪氨酸15位點(diǎn)激活CDK5而介導(dǎo)神經(jīng)元損傷。

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