通關(guān)藤提取物抗惡性血液系統(tǒng)疾病作用的實驗研究.pdf

1、[目的] 探討通關(guān)藤提取物（商品名：消癌平）抗惡性血液系統(tǒng)疾病作用及機(jī)制，以及通關(guān)藤提取物對正常免疫細(xì)胞及造血干細(xì)胞功能的影響。 [方法] 以0μL/mL～100μL/mL的通關(guān)藤（Marsdenia tenacissima）提取物處理Jurkat、Raji、RPMI8226、HL-60、K562細(xì)胞株1～5天，MTT法檢測其對5種細(xì)胞的抑制作用；流式細(xì)胞儀檢測分析細(xì)胞周期改變。檢測Jurkat、Raji、RPM

2、I8226細(xì)胞株的凋亡機(jī)制，采用Annexin V/PI雙染法觀察細(xì)胞形態(tài)并檢測其凋亡率，JC-1染色法檢測細(xì)胞線粒體跨膜電位（△Ψm）水平；Western blot檢測細(xì)胞半胱氨酸蛋白酶（Caspase）-3蛋白表達(dá)。采用MTT法檢測通關(guān)藤提取物對正常、ConA及LPS誘導(dǎo)的人淋巴細(xì)胞增殖活性的影響，中性紅法檢測巨噬細(xì)胞的吞噬功能，CFU-GM半固體集落培養(yǎng)法檢測造血干細(xì)胞的集落形成能力。 [結(jié)果] 1.通關(guān)藤提取物體

3、外對HL-60、K562、Jurkat、Raji、RPMI8226等5種細(xì)胞株具有不同程度的增殖抑制作用。在相同作用條件下，通關(guān)藤提取物對Jurkat的抑制率較高、且呈現(xiàn)出劑量依賴性。通關(guān)藤提取物可誘導(dǎo)RPMI8226和Raji細(xì)胞阻滯在G2期，對其他細(xì)胞無明顯周期阻滯。 2.通關(guān)藤提取物體外對Jurkat、Raji、RPMI8226細(xì)胞株具有不同程度的誘導(dǎo)凋亡作用。Jurkat的凋亡率最高，且呈現(xiàn)出劑量、時間依賴性。25、50

4、μL/mL的通關(guān)藤提取物能降低Jurkat、Raji細(xì)胞內(nèi)△Ψm，并促進(jìn)其凋亡。100μL/mL的通關(guān)藤提取物也可降低RPMI8226細(xì)胞△Ψm而誘導(dǎo)其凋亡。50μL/mL的通關(guān)藤提取物處理組細(xì)胞Caspase-3蛋白的表達(dá)水平較對照組無明顯改變。 3.通關(guān)藤提取物體外對ConA誘導(dǎo)的正常淋巴細(xì)胞和LPS誘導(dǎo)的正常淋巴細(xì)胞有促增殖作用且呈劑量依賴性。通關(guān)藤提取物對正常巨噬細(xì)胞吞噬中性紅染液的能力無明顯影響。對正常骨髓/外周血造血